BmBDVNs1基因启动子元件特征分析.docVIP

家蚕双生浓核病毒非结构基因-1启动子元件的特征 摘要：BmBDV是一种拥有两条单链线状DNA（VD1和VD2）的病毒，该病毒对家蚕有着高致病性。先前的研究发现非结构蛋白ns1和ns2基因存在相同的转录物。为了研究ns1和ns2基因转录调控机制，克隆ns1基因5’侧翼区的289个碱基，包含末端共有序列（CTS）和预测的P5启动子（从病毒基因组5’终点到ns1基因转录起始点），融合到荧光报告基因上游。荧光报告实验表明，VD1和VD2的53个CTS能够降低P5启动子活性13.3%。在不同细胞株的对比实验中发现，P5启动子在BmN和Hi5细胞株中具有较高的启动子活性。有趣地是P5启动子在Hela细胞（人类的一种癌症细胞）中也具有很高的活性。随后的启动子缩短实验表明，31个碱基（-236～-206）序列对于P5启动子的活性非常重要，删除后将导致其活性降低至36.5%。然而删除TATA框，其活性也保持在26.5%，表明该启动子对TATA框有独立性。而且，为了进一步了解P5 启动子活性的强度，通过实验对比了其它3种启动子，分别是Bm-actin3、BmNPV-ie-1和人工合成的3×P3启动子，结果表明P5启动子的活性比其它3种启动子的活性低。 背景介绍：家蚕双生浓核病毒（BmBDV）被定义为家蚕浓核病毒Ⅱ型（BmDNV-Ⅱ）或者家蚕类细小病毒（BmPLV），该病毒能够感染家蚕中肠上皮组织的圆筒