(优)转基因动物技术 课件.pptVIP

Neo基因 卡那霉素抗性基因编码的是新霉素磷酸转移酶II，基因记做neo，能通过降解G418、新霉素和卡那霉素来实现真核和原核细胞的相应抗性。 一般应用于原核生物就是卡那霉素抗性基因,应用于真核生物就是G418抗性。 外源基因导入ES细胞的方法有: 1.电穿孔法 2.逆转录病毒载体法 3.脂质体包装法 4.磷酸钙沉淀法 三、囊胚注射和杂交筛选 小鼠基因型的鉴定？ 标准品系：ES细胞品系：E14Tg2a (129背景)； JM8(C57BL/6N品系)； JM8A3(C57BL/6N 品系，Agouti毛色)注射用囊胚品系：C57BL/6×C57BL/6 129和C57BL/6纯系小鼠 近交系Inbred Mice C57BL/6 129 C57BL/6品系较纯，回交较少代数后性状就能稳定。 129品系ES细胞的优点是它们比较皮实，容易操作。 C57BL/6 ES cell比较娇嫩。 表1.用基因打靶法制备的一系列重要的基因敲除小鼠及表型： 敲除基因 表现型 RAG-1和/或RAG-2 因无TcR基因重排而无T细胞 TcRβ