(优)生物化学 蛋白质的生物合成.pptVIP

第十三章 蛋白质的生物合成（翻译） Biosynthesis of Protein or Translation 蛋白质生物合成的概况 概念：以mRNA为模板合成蛋白质的过程，又称翻译。 原料：20种氨基酸（1954年 Paul Zamecnik等） 中介分子：tRNA、mRNA、rRNA 分子(1958年M.B.Hoagland等)。 64个遗传密码（1961～1966Nirenberg等） 合成方向：从肽链的N端到C端（1961年Howard Dintzis） 合成场所：核糖体 合成体系建立：（1973～1976年） 第一节 蛋白质生物合成的基本条件 一、 mRNA是蛋白质合成的直接模板 （一）mRNA的一般特点： 种类繁多 大小不一：500～6000个碱基 半衰期短：原核生物1～3分钟，真核生物数小时或几天 占细胞总RNA：1%～2% 真核mRNA的5′端有N7-甲基鸟苷的“帽状”结构：具有稳定mRNA及有助于翻译起始的作用 3 ′端有20～250个多聚腺苷酸（PolyA）的“尾状”结构：具有维持mRNA翻译模板的活性 *（组蛋白除外） 翻译时是从mRNA编码区的起始密码子开始至终止密码子结束。 遗传密码(genetic code)：指mRNA分子中从5′→3′端记数，三个相邻的核苷酸为一组，代表某中氨基酸或其它信息,这相邻的三个核苷酸称为一个遗传密码。 遗传密码供有多少个呢？ （二）遗传密码的特点 方向性（directionality） 2.连续性（commalessness） 3 .简并性(degeneracy) 4.通用性（universality） 遗传密码的特点 通用性（universality） 5.摆动性（wobble） 二、核糖体（rRNA）是蛋白质合成的场所 (一)rRNA的特点 种类：原核生物有5S 、 23S、16S rRNA；真核生物有28S、18S、5.8S、5S rRNA 含量最多：占细胞总RNA 80%～90% rRNA与蛋白质构成核糖体 （二）核糖体上的主要功能部位 三、tRNA是运输氨基酸的工具 tRNA的特点： 分子量最小：60～90个碱基 含有较多的稀有碱基 5′端大多为pG, 3′端均为-CCA 反密码子的第一位碱基常出现次黄嘌呤（I） 细菌中有30～40种tRNA；真核细胞中有40 ～ 50种tRNA。 四、参与蛋白质合成的酶类 （一）氨基酰-tRNA合成酶 催化氨基酰-tRNA的合成，兼有酯酶活性。具有校正功能（误差10-4） 氨基酰－tRNA合成酶使tRNA识别特异的氨基酸。 氨基酸的活化形式：氨基酰-tRNA 　 氨基酸的活化部位：是羧基 原核生物肽链的起始氨酰-tRNA为甲酰蛋氨酰-tRNA ;而真核生物肽链为蛋氨酰-tRNA （二）肽酰转移酶(peptidyl transferase)（核酶） 催化肽键生成，兼有酯酶活性 -原核23SrRNA；真核28SrRNA 肽链合成方向：N→C （三）转位酶催化核糖体移位 原核生物由延长因子G(80kD)催化 真核生物由延长因子2（100kD）起作用 五、主要的蛋白因子 起始因子（initiation factor,IF）（真核起始因子，eukaryotic initiation factor,eIF）：参与翻译的起始 延长因子（elongation factor,EF）：参与肽链的延长 终止释放因子（releasing factor,RF）及核蛋白体释放因子（ribosomal releasing factor, RRF）：参与肽链合成的终止 第二节 　肽链的生物合成过程 一、原核生物的肽链合成过程 （一）翻译的起始阶段 在起始因子的作用下，fMet-tRNAifMet、mRNA与核糖体结合，形成70S起始复合物的过程。此阶段需要GTP及Mg2+参加 起始阶段包括四个小事件的发生 核蛋白体大小亚基分离 mRNA在小亚基上定位结合 fMet-tRNAifMet的结合 核蛋白体大亚基的结合 1.核蛋白体大小亚基分离 2.mRNA在小亚基上定位结合 mRNA定位基础是S-D序列 S-D序列（核糖体结合位点）是指位于mRNA起始密码（AUG）的上游约8～13核苷酸部位存在有4～9个核苷酸组成的一致序列，如AGGAGG。 小亚基上16S rRNA 的3′端存在有与S-D序列互补的序列UCCUCC mRNA在小亚基上定位结合 3. fMet-tRNAifMet结合到小亚基-首先占据P位 4.核蛋白体大亚基的结合 IF2自复合物解离的同时发生GTP水解（消耗一个高能磷酸键），大亚基随之与小亚基结合，并释放各种起始因子，