第十四章基因工程导论.pptVIP

第十四章 基因工程导论 基因工程：指采用类似工程设计的方法，人为地在体外将核酸分子插入质粒、病毒或其他载体中，构成遗传物质的新组合，并将它转移到原先没有这类分子的寄主细胞中扩增和表达。 第一节 基因工程的原理和一般方法 基因工程的基本原理 基因工程的基本内容和技术 （一）基因工程的基本内容 （1） 分离目的基因 ，或 人工合成基因； （2）与载体分子在体外连接，形成重组DNA分子； （3）把重组DNA分子引入到适宜的受体细胞中进行扩增； （4） 获得重组DNA分子的受体细胞的克隆； （5）提取已扩增的目的基因后，或再将其克隆到表达载体上，导入寄主细胞，以便在新的背景下实现功能表达，产生人们所需要的物质；或是将已扩增的目的基因做进一步的分析研究。 重组工程菌株的构建 WT-ADI DH5? -pET-28a -arcA acrA ADI pET-28a -arcA Rosetta -pET-28a -arcA （二）基因工程的基本技术 核酸电泳技术 核酸杂交技术 转化技术 DNA的酶切和连接技术 DNA测序技术 DNA 合成技术 PCR技术 PCR扩增基因： 　聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)可以体外快速扩增DNA。 　　美国Mullis(1986)发明(现代生物学发展史上的里程碑)。 PCR反应三个步聚(一个循环)： 1. 变