第3章.酶研究.ppt

酶和维生素 维生素（Vitamin） 定义：是维持机体正常功能所必需，但在机 体不能合成或合成量不足，必需由食物供给 的一组低分子量有机化合物。 分类： 脂溶性维生素－A、D、E、K 水溶性维生素－B族、C 脂溶性维生素的特点 * 均为非极性疏水的异戊二烯衍生物 *不溶于水，溶于脂类及脂肪溶剂 *在食物中于脂类共存，并随脂类一同吸收 *脂溶性维生素在血液中于脂蛋白或特异的结合蛋白结合运输 *脂溶性维生素排泄缓慢，只有长期缺乏供应或吸收 不良，才会出现缺乏症。而摄入过量又能引起中 毒。 水溶性维生素的特点 *能溶于水 *体内不能储存，随尿液排除，易出现缺乏症 2.邻近效应与定向排列使诸底物正确定位于酶的活性中心 反应模式 有些疾病的发病机理直接或间接和酶的异常或酶活性受到抑制相关。 许多疾病也可引起酶的异常，这种异常又使病情加重。 激素代谢障碍或维生素缺乏可引起某些酶的异常。 酶活性受到抑制多见于中毒性疾病。 2. 酶与疾病的诊断 酶的测定有助于对许多疾病的诊断 血清酶对某些疾病的诊断具有更重要的价值 3. 酶和某些疾病的治疗 1）酶作为药物治疗的靶点： 许多药物可通过抑制生物体内的某些酶来达到治疗目的。 通过阻断相应的酶活性，以达到遏制肿瘤生长的目的。 2）酶还可以直接用于治疗目的。 2）酶标记测定法是酶学与免疫学相结合的一种测定方法 3）工具酶广泛地应用于分子克隆领域 4）酶的分子工程是方兴未艾的酶工程学 酶分子工程主要是利用物理、化学或分子生物学方法对酶分子进行改造，包括对酶分子中功能基团进行化学修饰、酶的固定化、抗体酶等等，以适应医药业、工业、农业等的某种需要。 固定化酶是固相酶 固定化酶是将水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为不溶于水但仍具有酶活性的酶衍生物。 固定化酶在催化反应中以固相状态作用于底物，并保持酶的高度特异性和催化的高效率。 抗体酶是具有酶活性的抗体 将底物的过渡态类似物作为抗原，注入动物体内产生抗体，则抗体在结构上与过渡态类似物互相适应并可相互结合。该抗体便具有能催化该过渡态反应的酶活性。当抗体和底物结合时，就可使底物转变为过渡态进而发生催化反应。 这种具有催化功能的抗体分子称为抗体酶(abzyme)。 ? ?? ? ? ? ?? ? ?-谷氨酰转移酶 ? ? ??? ? ? ? ? 淀粉酶 小肠穿孔小肠穿孔 ? ? ??? ? ? ? ? 脂酶 ? ? ? ?? ??? ? ? 肌酸激酶 巨幼红细胞性贫血 ?或? ??? ? ?? ?? ? ? 乳酸脱氢酶 前列腺癌 ?或? ? ? ? ? ? ? 酸性磷酸酶 骨疾病，骨折 ??? ?? ? ? ? ?? ? 碱性磷酸酶 ? ?? ? ?? ? ? ??? 天冬氨酸转氨酶 ? ? ? ?或? ?或? ? ??? 丙氨酸转氨酶 有机磷化合物中毒 ? ?? ? ? ? ?或? ?? 胆碱酶酯 骨 肝 其他 肿瘤转移到 急性胰腺炎 急性心肌梗死 肌营养不良 胆管阻塞 病毒性肝炎 酶水平的改变 血清酶 酶测定方法： 终点法：在某一反应体系中，加入样品后让反应进行一段时间（常为数十分钟）再终止反应，测定反应后生成的产物量或消耗的底物量来判断样品中的酶活性。 速率法：通过连续监测手段，测定含有某样品的特定反应体系在单位时间（数十秒）内产物的生成量或底物的消耗量来判断样品中的酶活性 4.酶广泛应用于研究或生产 酶法分析即酶偶联测定法(enzyme coupled assays)，是利用酶的专一性特性，对一些酶的活性、底物浓度、激活剂、抑制剂等进行定量分析的一种方法。 1）酶法分析是以酶作为工具对化合物和酶活性进行定量分析的一种方法 酶标记测定法是利用酶检测的敏感性对无催化活性的蛋白质进行检测的一种方法。酶可以代替同位素与某些物质相结合，从而使该物质被酶所标记。通过测定酶的活性来判断被其定量结合的物质的存在和含量。 当前应用最多的是酶联免疫测定法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）。 除上述酶偶联测定法外，人们利用酶具有高度特异性的特点，将酶做为工具，在分子水平上对某些生物大分子进行定向的分割与连接。 低浓度的重金属离子（如Hg