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课题1 微生物的实验室培养 课程标准 进行微生物的分离和培养。 课标解读 1.知道培养基的基础知识,进行无菌技术的操作。 2.进行微生物培养。 1.培养基 (1)培养基概念 按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。 (2)培养基种类 包括 培养基和 培养基等。 (3)培养基的化学成分 一般都含有 、 、 和 四类营养成分。还需要满足微生物生长对 、 及 等的要求。 2.无菌技术 (1)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下四个方面 ①对实验操作的 、操作者的 ,进行清洁和 ; ②将用于微生物培养的器皿、 和 等进行 ; ③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行; ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (2)消毒和灭菌 ①消毒:消毒是指使用较为温和的 方法仅杀死物体表面或内部一部分 的微生物, (包括;不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。 ②灭菌:灭菌是指使用 杀死物体内外 , (包括,不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 灭菌、 ___灭菌和 灭菌。 [思维激活1] 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么? 提示 酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 1.碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳 2.培养基类型划分 3.无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别 (2)无菌技术主要操作要求 ①实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。 ②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 特别提示 (1)微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 (2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机物既是碳源,又是氮源、能源。 (3)大凡对生长因子不能合成或合成能力有限的微生物,其培养基中均需额外添加生长因子,而许多微生物能自行合成生长因子,其培养基中不需再添加。 【巩固1】 下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是 ( )。 A.①③ B.②① C.②④ D.③① 解析 高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来,有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。 答案 D 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤: →称量→ → →倒平板。 (2)倒平板的过程: ①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手 。 ②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过 。 ③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻 。 ④待平板冷却凝固后,将平板 放置,使皿盖在下、皿底在上。 2.纯化大肠杆菌 (1)微生物接种的最常用方法是 和 。 (2)平板划线法:通过 在琼脂固体培养基表面 的操作,将聚集的菌种 。 (3)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的 ,然后将不同稀释度的菌液分别
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