[造血干细胞捐献者的HLA基因分型.pptVIP

 造血干细胞捐献者血样的 HLA基因定型及资料录入  邓志辉  深圳市输血医学研究所 2005年5月16日 主要工作流程 一、各“工作站”将审核、遴选合格的造血干细胞捐献者血样（贴有骨髓条码），以及捐献者样本清单（捐献者姓名及骨髓编号），一并送达我研究所免疫遗传实验室； 二、免疫遗传实验室对捐献者血样进行HLA-A、B和DRB1基因定型，对送检血样的HLA基因定型结果负责； 三、出具“捐献者HLA基因分型检测结果”报告。 主要内容 （1）捐献者HLA基因定型血样的运输 （2）HLA相关基本概念 （3）HLA分型（定型）技术 HLA血清学分型技术 HLA基因分型技术 捐献者HLA基因定型血样的运输 注意事项： 1、因“登记表”中填写的内容审核不合格血样、以及经HBV等化验检查健康不合格的血样，予以剔除； 2、检查血样管有无破管； 3、路途远、条件许可，可放置适量干冰； 4、由专人运送，防震、防颠覆； 5、合格的HLA基因定型血样与捐献者样本清单一并送往组织配型实验室。 人类白细胞抗原(Human Leucocyte Antigen, HLA) 1958年，Dausset采用白细胞凝集实验，检测出第一个人类白细胞 抗原Mac（A2）。 为高度复杂的遗传多态性系统，每个人的HLA千差万别，即人体生物学的“身份证” ， 不同的民族、同一民族不同的地域，HLA基因及单倍型分布有其特点， HLA为人类主要组织相容性系统（MHC），与移植排斥反应密切相关，又称移植抗原。 是机体“识别自身”、“排除异已”的主要遗传标记，参与免疫应答反应。 HLA基因家族位于人类第6号染色体短臂，全长3.6 Mb，HLA基因家族是迄今为止最复杂、多态性最丰富、免疫功能相关基因最集中、与疾病关联最密切的一个区域。 HLA抗原的分类 HLA-I类：由一条具有多态性的α多肽链和一条没有多态性的?2微球蛋白通过非共价键组成异二聚体。 经典HLA-I类抗原：包括HLA-A、B、C位点抗原，分布于几乎所有有核细胞表面上。如T淋巴细胞、B淋巴细胞等，血小板上吸附HLA-A、B抗原。 非经典HLA-I类抗原：包括HLA-E、G 、F位点抗原，抗原在特定时间选择性分布。 HLA-II类：由34KD的? 链和29KD的β链以非共价键连接而成，包括HLA-DR、DP、DQ抗原； 仅分布于B淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等少数细胞表面。 HLA-Ⅲ类：主要包括补体分子C2、C4及Bf等。 HLA抗原结构 HLA的免疫原性及骨髓库建库工作中常规检测的HLA位点 HLA是一个高度复杂的遗传多态性系统，如： 经典HLA-I类抗原：HLA-A、B、C位点抗原； 非经典HLA-I类抗原：HLA-E、G 、F位点抗原 HLA-II类：HLA-DR、DP、DQ位点抗原 HLA的免疫原性，主要以HLA-A、B和DRB1的免疫原性较强，因此，骨髓库建库工作中，通常仅对HLA-A、B和DRB1位点进行定型。 无关供者骨髓移植中，NMDP、JMDP有研究资料表明，供/受者对HLA-CW基因的匹配程度，与GVHD、移植成活率相关。 HLA基因 定位于人类第6号染色体短臂（6p21.31），全长3.6 Mb，占人类基因组碱基数的0.1%。 HLA-I类基因：有10个遗传座位，靠近染色体顶端，HLA-A、B、C、E、G、 F为表达基因，H、J、K、L为假基因，无基因产物。 HLA-Ⅱ类基因：靠近染色体着丝粒端，主要包括HLA-DR、DP、DQ基因座。 HLA基因结构 体细胞为二倍体，同源染色体之间相互配对， 每一HLA位点有2个等位基因，一个来自于母亲，另一个来自于父亲。 检测HLA-A、B和DRB1三个位点，有6个等位基因，即6个HLA分型数据。 检出的HLA抗原及等位基因 2003年世界卫生组织（WHO）HLA因子命名委员会命名的HLA等位基因： HLA座位 等位基因 特异性 HLA-A 250 24 HLA-B