2015-2016学年高中生物专题二细胞工程222动物细胞融合与单克隆抗体课时作业.doc

2.2.2　动物细胞融合与单克隆抗体 目标导航　1.掌握动物细胞融合的原理和方法。2.结合图2－24，归纳单克隆抗体的制备过程及应用。 一、动物细胞融合(阅读P52－53) 1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。 2．原理：细胞膜的流动性。 3．诱导融合的方法：(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。 (2)生物方法：灭活的病毒。 4．过程：不同遗传信息的两个或多个细胞杂交细胞。 5．结果：形成杂交细胞。 6．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。如：利用动物细胞融合技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 二、单克隆抗体(阅读P52－54) 1．传统抗体的获得 (1)方法：①向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；②从动物血清中分离所需抗体。 (2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。 2．单克隆抗体的制备 (1)制备原理 ①浆细胞特点：一种B淋巴细胞产生一种单一抗体，B淋巴细胞在体外不能(能/不能)无限增殖。 ②骨髓瘤细胞特点：能无限增殖。 ③杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 (2)制备过程 制备特异性 ①向小鼠注射特定抗原蛋白 ②从小鼠脾脏中获取相应B淋巴细胞 B淋巴细胞 　? 获得杂交 ①将鼠的骨髓瘤细胞与脾中形成的B淋巴细胞融合 ②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体) 瘤细胞 　? 克隆化培养和抗体检测 　? 将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔中增殖 　? 提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取 (3)单克隆抗体优点：特异性强、灵敏度高、并可大量制备。 (4)单克隆抗体的应用 ①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。 ②用于治疗疾病和运载药物。 判断正误： (1)动物细胞融合也称细胞杂交，使远缘杂交成为现实。(　　) (2)动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。(　　) (3)动物细胞融合的主要用途是制备克隆动物。(　　) (4)杂交瘤细胞是由经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的，具有既能无限增殖又能产生特定抗体的能力。(　　) (5)单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制备。(　　) (6)单克隆抗体可以用于治疗疾病。(　　) (7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性。(　　) (8)动物细胞核融合发生在杂种细胞的有丝分裂过程中。(　　) 答案　(1)×　(2)√　(3)×　(4)√　(5)√　(6)√　(7)×　(8)√ 一、动物细胞融合 1．对细胞膜融合过程的理解 (1)细胞融合的过程包括细胞膜的融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜的融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有流动性。 (2)诱导融合的方法有灭活的病毒(最常见)、聚乙二醇(PEG)和电激等。 2．动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 细胞融 合方法 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后，诱导细胞融合 诱导手段 离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导 与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的病毒诱导 结　果 形成杂种植株 形成杂种细胞，以生产细胞产品 用　途 克服远缘杂交不亲和的障碍，扩展杂交亲本范围，培育新品种 制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等 意义 突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 1．动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有何不同？ 答案　动物细胞融合可用灭活的病毒进行诱导。 2．细胞融合技术与有性杂交相比有哪些优点？ 答案　有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限。动物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。 3．动物细胞融合和受精作用的区别有哪些呢？ 答案　(1)受精作用是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂就能形成受精卵，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。 (2)动物细胞融合是在不同物种间进行的细胞融合，由于物种间存在生殖隔离，所以在自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂作用才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性。 4．动物细胞融合完成的标志是什么？ 答案　动物细胞融合完成的标志是来自不同细胞的两个或多个细胞核融合成一个细胞核。 1．与植物体细胞杂交相比，动物细胞融