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实心方块、实心圆、 实心三角、实心反三角标 记曲线分别代表25℃, 40℃、 60℃、 80℃。 这12种,即5组异构体,发生了位置异构: 在A组中(t,t,t,t,)异构体3被异构化为了1和2, 即由9,11,13,15-18:4 异构化为10,12,14,16-18:4 和11,13,15,17-18:4 两种位置异构体。 在组B、C、D、E中也发生了类似的位置异构体的转变 从图中可以看出,甲基化反应的温度越高,时间越长,t,t,t,t-的含量也越大。在组B中c,t,t,t-异构体情况类似,与A组不同的是,当温度为80 ℃,反应时间达到40分钟和60分钟时,c,t,t,t-异构体的含量降低,也就是说80 ℃,40分钟是c,t,t,t-异构体含量发生变化的拐点,这个拐点表明在这个反应条件下c,t,t,t-异构体转变为了t,t,t,t-异构体。在组C,组D和组E中, 随着温度的升高,对应的各个异构体的含量都下降了。因此我们可以断定,在甲基化过程中c,t,t,c-, c,t,c,c-, 和 c,c,c,c- 都被异构化为了 t,t,t,t 和c,t,t,t。也就是说,在甲基化过程中顺式构象转变为了反式构象。 本研究揭示了异构化过程中的两个规律,一个是, 异构化是和反应的温度,时间有关的过程,温度越高, 时间越长,异构化越严重。 另外一个是,不同异构体之间的相互转化与它们 的位置,顺反构型有关的。从表中得出下面的结论: 9,11,13,15-18:4异构化为 10,12,14,16-18:4, 11,13,15,17-18:4 或者8,10,12,14-18:4位置异构体,得出的另外一个结论: c,t,t,c-, c,t,c,c-, 和c,c,c,c-异构化为 t,t,t,t 和 c,t,t,t。 结论 四、CLA、CLN和PnA对肿瘤细胞的影响 ?4.1 CLA对肿瘤细胞 BEL-7402 的抑制作用 ?4.2 CLN 对肿瘤细胞BEL-7402的抑制作用 ?4.3 PnA对肿瘤细胞BEL-7402的抑制作用 MTT又叫噻唑蓝,是一种黄颜色的染料, MTT法是一种检测 细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的 琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶 甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。 4.1 CLA对肿瘤细胞 BEL-7402 的抑制作用 组别 药物浓度(?M) A(吸光度值) 抑制率(%) 对照组 0.05850 CLA 组 1 10 50 100 500 0.04667 0.03817 0.04117 0.04483 0.01850 20.23 34.76 29.63 23.36 68.38 4.2 CLN 对肿瘤细胞BEL-7402的抑制作用 组别 药物浓度(?M) A(吸光度值) 抑制率(%) 对照组 0.05850 CLN 组 1 10 50 100 500 0.04867 0.04717 0.05517 0.05367 0.01633 16.81 19.37 5.698 8.262 72.08 4.3 PnA对肿瘤细胞BEL-7402的抑制作用 组别 药物浓度(?M) A(吸光度值) 抑制率(%) 对照组 0.05850 PnA组 1 10 50 100 500 0.04869 0.04397 0.02984 0.02041 0.009423 11.74 13.42 35.23 31.74 76.51 脂肪酸的浓度越大,吸光度越小,对肿瘤细胞生 长的抑制作用也越大。 结 论 2. 三种脂肪酸对肿瘤细胞生长的抑制作用为 CLA<CLN<PnA。即:共轭双键的数目越多, 对肿瘤细胞生长的抑制作用越大。 五、共轭十八碳四烯酸甲酯与BSA和 小牛胸腺DNA相互作用 ?5.1 与BSA作用 ?5.2 与CTDNA相互作用 5.1 与BSA作用 (1) 荧光光谱 (2) 猝灭机理的推断 荧光猝灭机理包括动态淬灭和静态淬灭两种。以上这些不同的淬灭机理我们可以通过对Stern–Volmer淬灭方程, 即 F0/F = 1 + Kq τ0[Q] = 1 + Ksv[Q] 的回归分析来加以判定。 在不同温度下PnAMe对BSA荧光淬灭的Stern-Volmer图 结论:PnAMe和BSA的淬灭反应为动态猝灭机理。 (3) 作用力类型的确定 药物和生物大分子之间的相互作用力包括氢键、静电 作用、范德华力、疏水力四种。根据反应前后热力学焓变 △H 和熵变△
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