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第三章 中药发酵工艺条件
发酵技术是利用微生物的某种特性,通过现代化的技术手段进行工业化大规模生产的技
术。目前由于我国人口过多,资源消费排在世界前列,加之资源短缺,所以应大力发展发酵技术。通过该项技术大规模地生产某种产品,将有助于解决我国资源短缺的问题。伴随着现代生命科学技术和分子生物学的迅猛发展,发酵技术及相关应用领域的研究也越来越活跃,已深入到食品、医药卫生、农业生产、轻工业等各领域中,特别是在中草药的发酵方面取得了很大的进展。例如,药用菌类植物是我国药用植物中的重要组成部分,在民间因其独特的防病、治病效果而有着悠久的历史;同时药用菌类植物还常常被作为中成药的原料药,所以具有非常广阔的应用前景。但目前我们已经注意到,野生型药用菌类植物已经被极度采集,致使资源愈来愈少,国内外市场资源紧缺。因此,如果单单通过野外采集等途径获得,很难满足医药市场的需求,而且价格十分昂贵。如采用发酵工程技术,给予适宜的条件来培养这些菌类植物,则可以达到快速、大规模生产的目的,这显然是一条非常好的技术路线。我国历史上早已有药用真菌的固体培养,如神曲的培养等。近几十年来,为适应市扬的需求,采用发酵技术生产药用真菌、菌丝体及其他代谢产物有了很大的发展。如传统名贵中药冬虫夏草、云芝、灵芝、蜜环菌等都已经投入到大规模的工业化连续生产中,发酵周期短,生产效益高。同时在发酵过程中,除了使菌丝体大量增殖,在发酵液中还可得到多糖、生物碱、酶、核酸等多种具有生物活性的次生代谢产物。通过研究表明,这些物质具有抗衰老、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、调节免疫等多种功效。利用发酵技术生产这些药用活性成分,还可进一步使药品生产规范化,药源质量、数量稳定,有利于这些药物的相关制剂打入国际市场。可见发酵技术在中医药中的应用已经有了一个良好的开端,引起了人们的极大关注。
培养基的选择和确定
培养基是按照微生物的生长、繁殖、代谢的需要,由各种营养物质按一定比例组合而成的混合体。微生物对培养基中营养物质的利用是通过向外界分泌大量的酶,将周围环境中大分子如糖类、脂肪、蛋白质等分解成小分子的营养物质,借助于细胞膜的跨膜物质转运功能从外界不断地吸收小分子的营养物质,一方面利用这些营养物质合成新的自身所需要的营养物质,另一方面利用这些营养物质获得所需要的能量。可见,培养基的构成及其配比是否恰当对生产菌种的生长、繁殖及代谢产物的合成,甚至对代谢产物的分离、提取、纯化及最终成品的产量和质量都将产生相当大的影响。一个良好的培养基,必须能够提供微生物生长、繁殖所需的各种营养成分,充分发挥生产菌种的生物合成能力,获得最佳的生产效果,从而提高发酵生产水平;一个好的培养基,其营养物质的配备比例,要通过长期的生产实践摸索,不断调整才能完善;一个好的培养基,其组成成分不是一成不变的,要根据不同菌种的特征、发酵生产中的不同阶段和菌种细小的变化情况加以适当调整。如种子生产中就常常通过调整培养基组成的方法来获得优质的孢子,提高发酵生产水平。
一、培养基的组成
在工业生产和科研工作中,无论哪一种培养基,都应满足微生物的生长、繁殖和发酵所需要的各种营养物质,而这些营养物质也就是培养基的组成。培养基中的原材料归纳起来有碳源、氮源、无机盐、水、生长因子和前体物质等几大类。其中碳源是组成培养基的主要成分之一,它是碳水化合物合成的原料,为微生物生命活动提供所需要的能量;氮源也是组成培养基的主要成分之一,是蛋白质和核酸合成的主要原料。但在实际工作中,由于微生物细
胞的种类不同,同一生产过裎的阶段不同、培养目的的不同,故所选用的培养基成分还是有一定差异的。
二、培养基的类型
根据微生物生长、繁殖和发酵的不同要求,培养基的成分和各成分的含量也是不同的,
所以培养基的种类很多。据估计目前约有数千种培养基。随着生物科学的飞速发展,培养基
的种类也在不断增加。一般来说根据培养基成分、物理状态、不同的使用目的以及生产工艺
的要求等可分为以下若干类型。
1.根据培养基的成分进行分类
分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基。
(1)合成培养基
合成培养基是利用化学成分和数量完全清楚的物质配制而成的。由于微生物对营养要求
的不同,它可以完全由无机盐或无机盐加有机化合物(氨基酸、糖、嘌呤、维生素等)组成。这种合成培养基的配方成分都是已知的,所以只要配制过程操作严格,各批培养基的质量可做到稳定一致。由于这种培养基的化学成分清楚、组成成分精确、重复性强,所以可以减少不能控制的因素,适用于某些定量工作的研究。但合成培养基的成本较高、价格较贵,其价格相当于同类天然培养基的几倍甚至几十倍,因此,合成培养基一般只能在研究工作中使用。同时,一般微生物在合成培养基上生长较慢,有些微生物营养要求复杂,在合成培养基上
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