HPLC原理与应用解析.ppt

高效液相色谱法 化学化工学院 1.HPLC仪器结构及原理 3.操作条件的选择—流动相的选择 流动相要求： (1)溶剂应当是高纯度，溶剂与固定相不互溶，并能保持色谱柱的稳定性； (2)溶剂的性能与使用的检测器应当匹配；选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长，甲醇：205nm; 乙腈：190nm (3)溶剂对样品应有足够的溶解能力； (4)溶剂应具有低的粘度和适当低的沸点； (5)尽量避免使用具有显著毒性的溶剂。 常用流动相溶剂： 洗脱方式—等度洗脱、梯度洗脱 等度洗脱： 整个洗脱过程中，流动相的组成比保持不变 梯度洗脱： 在一个分析周期中，按照一定的时间程序连续或阶段性的改变流动相的组成比，从而改变溶剂的极性、离子强度、pH值等，使每个组分在适宜的条件下获得分离。 梯度洗脱优点： 改善峰型；提高柱效；减少分析时间；使强滞留组分不容易残留在柱子。 梯度洗脱装置 4.HPLC在各领域的主要应用 1.环境:多环芳烃、多氯联苯、硝基化合物、酚类化合物、邻苯二甲酸脂等。 2.食品:食品营养成分分析、食品添加剂分析、食品污染物分析。 3.医药:合成药物：抗生素、抗忧郁药物、黄胺类药等；天然药物：鉴别中药真伪或者产地、吲哚碱、鸦片碱、强心甙测定等。 4.农药:有机农药、除草剂等。 5.化工:无机化工产品、合成高分子化合物、表面活性剂、洗涤剂成分、化妆品、染料等。 1.环境保护