发酵工程111111111..docxVIP

发酵工程：利用微生物的生长和代谢活动来大量生产人们所需产品的过程理论与工程技术体系，并将DNA重组及细胞融合技术、酶工程技术、组学及代谢网络调控技术、过程工程优化与放大技术等新技术与传统发酵工程融合，大大提高传统发酵技术水平，拓展传统发酵应用领域和产品范围的一种现代工业生物技术体系。发酵工程特点：发酵过程一般是在常温常压下进行的生化反应，反应安全，要求条件较简单。可用较廉价原料生产较高价值产品。反应专一性强。能够专一性地和高度选择性地对某些较为复杂的化合物进行特定部位的生物转化修饰。发酵工业的基本生产过程：用作种子扩大培养及发酵生产的各种培养基的配制；.培养基、发酵罐及其附属设备的消毒灭菌；扩大培养出有活性的适量纯种，以一定比例接种入发酵罐中；. 控制最适发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物；. 将产物提取并精制，以得到合格的产品；. 回收或处理发酵过程中所产生的三废物质。未培养微生物：指迄今所采用的微生物纯培养分离及培养方法还未获得纯培养的微生物，其在自然环境微生物群落中占有非常高的比例，约为99％。菌种选择的总趋势：野生菌→变异菌自然选育→代谢控制育种诱发基因突变→基因重组的定向育种菌种选择的要求：能在廉价原料制成的培养基上迅速生长，且生成的目的产物产量高、易于回收；生长速度和反应速度较快，发酵周期较短；培养条件易于控制；抗噬菌体及杂菌污染的能力强菌种不易变异退化对放大设备的适应性强菌种不是病原菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素。设计筛选方案时必须考虑两个要点：选择性、灵敏度。筛选步骤: 调查与研究设计方案含微生物样品的采集样品预处理菌种分离（根据目的菌株及产物的特点）采用选择性分离方法（富集液体培养或固体培养基培养）或者随机性分离方法菌种纯化复筛菌种纯化生产性能测试取较优菌株保藏或进一步实验。连续富集培养技术分离菌株的优点：分离的菌株特别适合连续发酵生产过程有利于分离具有某种工业生产特性的菌株可以筛选出能共生的稳定混合培养物固体培养技术常用于分离某些酶生产菌。在选择培养基中加入所需酶的基质。随机性分离技术：从产物入手，通过设计高产培养基和建立快速灵敏专一的筛选方法，从随机分离的菌落中筛选出所需的目的菌。代谢工程：利用多基因重组技术有目的地对细胞代谢途径进行修饰、改造，改变细胞特性，并与细胞基因调控、代谢调控及生化工程相结合，为实现构建新的代谢途径，生产特定目的产物而发展起来的一个新的学科领域。培养基：培养基是指一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。发酵培养基要求：①培养基能够满足产物最经济的合成。②发酵后所形成的副产物尽可能的少。③培养基的原料应因地制宜，价格低廉；且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应。④所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。生长因子：微生物生长必不可少的微量有机物，如氨基酸、嘌呤、嘧啶。前体：某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成中合成到产物分子中，而自身机构变化不大，产物产量却因加入前体而大幅度提高。（青霉素、苯乙酸）产物促进剂：非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。培养基成分的选择原则：菌种的同化能力、代谢的阻遏和诱导、合适的C/N比、PH要求。培养基的设计步骤：1 根据前人经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初步确定可能的培养基成分。2 通过单因子实验确定最适宜的成分，3通过合适的试验方法确定各成分最适浓度。灭菌与消毒的区别灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。灭菌的必要：1生物反应的基质或产物因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降。2由于杂菌所产生的一些代谢产物改变了发酵液的某些理化性质，使目标产物的提取困难，造成收得率降低或使产品质量下降。3污染的杂菌可能会分解产物，而使生产失效。4发生噬菌体污染，微生物细胞被裂解，而使生产失效。灭菌方法：1 化学试剂灭菌：利用化学试剂对微生物的氧化或损伤作用灭菌。2 射线灭菌:用紫外线、高能电磁波穿透微生物进行灭菌。3 干热灭菌法：利用热空气将微生物体内的蛋白质氧化进行灭菌4 湿热灭菌法：利用高温饱和蒸汽将物料的温度升高使微生物体内的蛋白质变性进行灭菌。湿热灭菌的优点：蒸汽具有潜热、蒸汽穿透力强，灭菌彻底、蒸汽来源容易，成本低、操作简单易管理。对数残留定律：分批灭菌：讲配置好的培养基放在发酵罐或其他容器中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起灭菌。连续灭菌：将配制好的并经预热的培养基用泵连续输入由直接蒸汽加热的加热塔，使其在短时间内达到灭菌温度（126～132℃