111无菌操作技术..docVIP

课题：1.1.1无菌操作技术 教学目标： 1、知识与技能： 了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术 2、过程与方法： 分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象 3、情感态度价值观： 形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神 教学重点： 无菌技术的操作 教学难点： 无菌技术的操作 教学方法： 启发式教学 教具使用： 多媒体课件，高压蒸汽灭菌锅及有关设备 教学过程 教师主导活动 学生主体活动 二次备课 课前： 高压蒸汽灭菌锅及有关设备的准备，布置学生预习。 及时了解学生的预习情况，认真准备课堂教学内容。 完成预习任务。 课中： 引入：在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用。 根据学生预习情况引导学生合作探究，成果展示。 重点强调高压蒸汽灭菌锅使用的注意事项及安全问题。 教师进行实验演示，并指导学生进行实验。 3．结果分析与评价 3．1　培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。 3．2　在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。 3．3　培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。 〖思考1〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。 〖思考2〗频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点是保存时间较短，容易发生污染和变异；后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在－20℃冷冻箱中。 安排学生进行课堂检测并进行讲评和总结。 学生展示： 1．1 培养基的种类 培养基的类型及其应用： 1．2 培养基的化学成分 从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有哪些营养成分？ 1．3 培养基应满足微生物生长要求。 牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供哪些营养物质。 活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题： 1．4 获得纯净培养物的关键是什么？。 1．5 无菌技术包括哪些？ 1．6消毒和灭菌区别？ 1．7 常用的消毒和灭菌方法分别有哪些？ 高压蒸汽灭菌锅使用注意事项有哪些？ 培养基的配制原则有哪些？ 完成课堂检测。（见学案） 课后： 布置课外作业及下一节预习提纲。（见导学案） 学生完成课外作业及下一节预习。 板书设计 教学札记 三、其他补充教学资料 1．基础知识 1．1 培养基的种类包括固体 培养基和液体 培养基等。 〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的 多糖 ，在配制培养基中用作为 凝固剂 。 【补充】培养基的类型及其应用： 1．2 培养基的化学成分包括 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 四类营养成分。 〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？ C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。 【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。 1．3 培养基除满足微生物生长的 pH 、 特殊营养物质 和 氧气 等要求。 【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。 〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 糖 、 维生素 和 有机氮 等营养物质。 〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ，培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ，培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 。 活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题： 1．4 获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵 。 1．5 无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。 1．6 比较消毒和灭菌（填表） 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量