2011级SRDP申请书..docVIP

项目 分类 自然科学 √ 社会科学 中国海洋大学 本科生研究训练计划（OUC-SRTP）项目 申 请 书 项目名称：深海微生物中抗生活性微生物的分离与筛选 申 请 者：楚艺 联系电话电子信箱：reddla@126.com 所在院系：医药学院 指导教师：朱伟明 申请经费金额：0000元 项目起止时间：2013-5-4—2014-4-20 申报时间：2013-04-07 二○一三 年四月七日 本科生研究训练计划管理委员会 一、基本情况 1．申请者情况 姓名 楚艺 性别 女 出生年月 1993.12 学部、院（系） 医药学院 专业年级 11药学 学号 180112011008 2．项目组成员情况 姓 名 学号 性别 出生年月 专业年级 分工 陈巧欣 180112011005 女 1992.10 11药学 微生物分离培养 郭慧杰 180112011011 女 1992.11 11药学 活性测试 3．指导教师情况 姓 名 朱伟明 职 称 教授、海洋天然产物化学主要从事海洋微生物药物化学研究，特别是海洋微生物所产生的含氮和卤代药物先导化合物的发现与优化。weimingzhu@ 电 话 4．课题来源：■科研 □教学 □设计 □工程 □自选 □其他（ ） 5．申请理由： ①小组成员均为医药学院药学专业本科同学，都已学习或将要学习有关专业知识，如《微生物学》等，有一定的理论基础和基本实验操作技能。在平时的学习中不仅注重对理论知识的理解，还十分重视实验技能的培养，因此完全有信心完成此次课题研究。 ②团队成员对海洋微生物化学成分研究有着浓厚的兴趣，业余时间经常讨论一些相关问题。 ③团队成员曾在朱伟明教授课题组做过一些微生物分离培养的实验，对海洋微生物研究过程有基本了解；此外，团队成员均有良好的团队合作精神 ④团队成员都为相同专业，且为同一寝室，彼此之间非常了解，课余在一起的时间很多，方便沟通和交流。 小组成员对科研有着相当的热情与信心，同时深知实验机会来之不易的道理。相信团队成员在朱老师的指导与学校的支持下,能够以认真负责的态度，运用熟练的实验技能，进行本次创新性实验，顺利、出色地完成实验项目。 二、项目方案 1．目的及意义 海洋药物研究经过半个多世纪的探索和发展，已经获得了宝贵的经验和丰富的研究资料，特别是近年来生物技术的迅猛发展，为海洋药物的研究开发提供了新的研究方法、研究思路和研究方向。尤其是生长在深海、极地等人迹罕至的海洋动植物，将可能含有某些特殊的化学成分，这些生物是当前以及今后的研究热点。 深海中的微生物面临高压低温或高温、黑暗及低营养水平等几个主要极端环境，长期以来一直被认为是一片“荒芜的沙漠”。[1]。 以赤道附近的罗曼什转换断层为界, 大西洋中脊可以分为南大西洋中脊和北大西洋中脊两部分。南大西洋中脊慢速扩张洋中脊,但由于调查程度有限, 目前对南大西洋中脊的地质、地球物理特征以及热液活动等认识还比较欠缺[2]。而本课题组有幸从国家海洋局获得了2859m深,经度13.413°W，纬度15.1843°S的南大西洋中脊沉积物样品若干，拟从中分离培养真菌和放线菌，并通过活性筛选、化学筛选获得次生代谢产物丰富的、活性强、产量大的深海微生物资源菌株,为抗菌新药的研究提供新的微生物资源。在药物的研发方面，深海微生物有着巨大的潜力。 因此，发展、改进海洋微生物的分离方法，从海洋特别是深海样品中获得新的海洋微生物，进而通过筛选来获得生产新活性物质的海洋微生物，成为发掘海洋微生物资源、研究开发海洋创新药物的第一步。 陶春辉, 李杨我国在南大西洋中脊发现两个海底热液活动区. 中国科学：地球科学 2011, 41, 887-889. 2．研究内容与研究方法 研究内容： 1. 深海微生物的分离培养2. 微生物的发酵根据同一培养基上形态相同进行排重，后用放线菌、真菌的液体培养基进行发酵。摇床震荡数日，直至菌体成熟。 3. 发酵样品的制备 向发酵液中加入萃取液，使发酵液及菌体破碎，进行超声震荡。混合均匀后，滤取有机层，再通过真空浓缩得浓缩液。所得浓缩液用旋转蒸干仪蒸干，浓缩馏分，得浸膏。 4. TLC、HPLC排重 取固相萃取后浸膏进行TLC（9：1的CH2Cl2-MeOH展开，生物碱显色，香草醛-浓硫酸显色）及HPLC排重。菌株拍照，TLC存档。 5. 抗菌活性测试 采用纸片排散法，选择金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等致病细菌和真菌，评价微生物发酵产物（浸膏）的抗菌活性，选出具有抗菌活性的微生物，并记录抑菌圈直径大小。 . 化学复筛 对活性浸膏进行HPLC分析和TLC进一步筛选（生物碱试剂