沈敏《酵母菌种群数量的变化》课件.pptVIP

实验学习内容 实验原理 实验设计思路 实验设计思路 实验步骤 血球计数板计数 血球计数板计数 实验数据记录 实验注意事项 实验结果分析 * * 探究“培养液中酵母菌种群数量的变化” 实验原理 实验设计思路 实验步骤 实验注意事项 实验结论 血球计数板计数 对照实验设置 实验数据记录表设计 思考： 1、酵母菌的呼吸方式。 2、酵母菌在液体培养基中繁殖其种群数量受哪些因素影响。 3、酵母菌种群数量增长的曲线类型。 思考： 如何设置对照实验探究“酵母菌种群数量变化”？ 提示： 从影响实验室中培养的酵母菌的因素来考虑 试管编号 A B C 试管内 液体 温度条件 对照实验设置 28℃ 5℃ 28℃ 培养液 无菌水 酵母菌 10 0.1 10 0.1 10 0.1 （1）向三支试管中加入培养液或无菌水 （2）向三支试管中接种酵母菌 （3）将三支试管在不同的温度下培养 （4）每天取样计数酵母菌 （5）分析数据画出曲线 （1）计数工具——血球计数板 实物图 正面图 侧面图 计数室 滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时，常采用样方法。 血球计数板计数 （1）计数工具——血球计数板 放大后的计数池 每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格。 血球计数板计数 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25X16 = 400小格 16X25 = 400小格 每个计数室（大方格）共有400小格，总容积为0.1mm3 * * * * * * * * * 抽样检测： 5×16=80个小格 抽样检测： 4×25=100个小格 思考： 1、使用16×25规格时计数几个中方格中的细胞数？即个小方格中的细胞数？ 2、设每个中方格中的细菌数分别是：A1，A2，A3，A4，稀释倍数为：B，则样品中细胞数/ml是多少？ 4个中方格，100个小方格 （A1+A2+A3+A4）/100 ×4000000×B （2）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？ 酵母细胞个数/mL= 所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数 所数的小方格数 连续多天统计，每天统计多次。请设计实验数据记录表格 时间 次数 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 平均值 酵母菌培养： 培养液配制 灭菌 接种 培养 配制质量分数为5％的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000 mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯） 用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。 接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌数过多。） 将烧杯置于28℃的恒温箱中培养 无菌 操作 讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？ 1、从试管中吸取培养液进行计数前，为什么需将试管轻轻震荡几次？ 2、若一个小方格内酵母菌数过多，难以数清，则如何处理？ 使培养液中酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。 将培养液稀释一定的倍数，再重新计数。 注意事项： 进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。 显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。 本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。 血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。 实验注意事项 试管 编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度（℃） A 10 — 0.1 28 B 10 — 0.1 5 C — 10 0.1 28 实验结果分析 1、分析酵母菌种群数量变化趋势的原因 2、分析影响酵母菌种群数量的因素。 养料、温度、pH及有害代谢废物等 数量 时间 *