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干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响.
题目:植物生理学实验
姓名:********
学号:**********
院系:生命科学学院
专业:********
干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响
专业:****** 学号:*********姓名:********
摘要:
本实验以小麦幼苗为材料,设置对照组,探究了干旱胁迫下脯氨酸(pro)、谷胱甘肽(GSG)、丙二醛(MDA)、H2O2的含量变化以及抗氧化酶(POD、PPO)活性的变化。结果表明:在干旱胁迫下,脯氨酸(pro)、谷胱甘肽(GSG)、丙二醛(MDA)、H2O2的含量相对于对照组均有较明显的上升趋势,POD和PPO活性也表现出较大水平的提高。
关键词:小麦;干旱胁迫发芽率生理生化指标
1.1实验材料的选取和培养
1.2干旱胁迫处理
1.3测定抗逆指标含量
1.3.1测定抗逆指标抗氧化酶(POD)的含量
1.3.2测定抗逆指标脯氨酸(Pro)的含量
1.3.3测定抗逆指标GSH的含量
1.3.4测定抗逆指标ASA的含量
1.3.5测定抗逆指标可溶性糖和丙二醛(MDA)的含量
1.3.6测定抗逆指标H2O2的含量
2 实验结果
2.1种子发芽率的测定
TTC法结果:48粒具有生命活力。曙红染色法结果:47粒具有生命活力。
分别计算两种方法的发芽率:TTC法中,48/50=96%;曙红染色法中,47/50=94%。
2.2脯氨酸含量的测定
实验组:A520=2.186A,对照组:A520=0.06A,
计算公式:Pro content=(mol.g-1FW)
其中,V显=6ml,V总=5ml,V用=2ml,520=3.24mol-1.cm-1,L=1cm,W=0.1g.
计算结果:实验组脯氨酸含量为101.204mol.g-1FW,对照组脯氨酸含量为2.77mol.g-1FW.
2.3 抗氧化酶活性的测定
POD活性:实验组为60.169 U.g-1FW,对照组为44.068 U.g-1FW.
PPO活性:实验组为7.168×10-4 mmol.g-1FWmin-1,对照组为3.828×10-4 mmol.g-1FWmin-1。
2.4 GSH(谷胱甘肽)的含量测定
实验组A412=0.540A,对照组A412=0.145A
2.5 MDA含量
测得的结果如下表所示:
OD450 OD532 实验组 0.888A 0.206A 对照组 0.199A 0.062A
最后计算得出浓度如下表:
实验组 对照组 C1/(mmol/L) 10.3985 2.3303 C2/(mol/L) 0.8314 0.2885 2.6 H2O2含量
计算结果如下:实验组的H2O2 含量为194.0475 mmol.g-1FW,对照组的为25 mmol.g-1FW。
3 讨论
本次试验我们的结果是,干旱胁迫小麦胚芽鞘中的脯氨酸(Pro)含量比正常小麦的多几倍,即干旱下小麦积累了脯氨酸(Pro)。已有很多试验证明了,干旱胁迫会使脯氨酸含量增加。脯氨酸(Pro) 是水溶性最大的氨基酸,具有很强的水合能力,其水溶液具有很高的水势。脯氨酸的疏水端可和蛋白质结合,亲水端可与水分子结合,蛋白质可借助脯氨酸束缚更多的水,从而防止渗透胁迫条件下蛋白质的脱水变性。因此脯氨酸在植物的渗透调节中起重要作用,而且即使在含水量很低的细胞内,脯氨酸溶液仍能提供足够的自由水,以维持正常的生命活动。正常情况下,植物体内脯氨酸含量并不高,但遭受干旱等胁迫时体内的脯氨酸含量明显增加。已有人证明了Pro的分解代谢开始于它的氧化分解,执行此功能的酶称为Pro脱氢酶(PDH),它以FAD为辅因子将Pro降解为P5C,后者在P5C还原酶(P5CR)的作用下又重新合成谷氨酸,完成Pro代谢的循环过程。所以,在Pro的降解过程中,PDH是Pro降解的关键酶。在逆境胁迫过程中,PDH的活性往往受到不同程度的限制,从而削弱了Pro的降解过程,因此越来越多的脯氨酸被积累。
两种抗氧化酶,多酚氧化酶和过氧化物酶在干旱胁迫中表现出不同的变化情 况,多酚氧化酶的含量较正常组呈上升趋势,而过氧化物酶则呈下降趋势。过氧 化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化
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