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高中生物高二人教版选修1课件:2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。 ◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。 (四)取样涂布 (五)微生物的培养与观察 不同类型的微生物形成的菌落往往有差别---微生物分类依据 (五)微生物的培养与观察 在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。 培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌:30~37℃培养1~2d 放线菌:25~28℃培养5~7d 霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。 三、操作提示 无菌操作 做好标记 规划时间 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数——步骤三 1.通过对照实验,若培养物有杂菌污染,菌落数偏高;若培养物混入其他氮源,则菌落形态多样,菌落数偏高,难以选择出分解尿素的微生物。 2.提示:选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊,如相差较大,表示实验不精确。 四、结果分析与评价 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变红,说明该细菌能够分解尿素。 测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后,将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上培养,大肠杆菌菌落呈现黑色,通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。 五、课外延伸 研究思路 菌种筛选 统计菌落菌数目 设置对照 土壤中分解尿素的分离与计数 操作提示 结果分析与评价 课外延伸 样品稀释 实验设计 涂布平板 培养观察 土壤取样 1.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与下图中的链霉素带接触),将平板置于37℃条件下恒温培养3天,结果如图所示。从实验结果分析以下叙述,不正确的是( ) A.链霉素能阻止结核菌的生长 B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效 C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D.链霉素可以用于治疗伤寒病人 D 2.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是( ) A.涂布了一个平板,统计的菌落数是230 B.涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238 C.涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163 D.涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233 D 3.下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程,据此回答有关问题 (1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌,从高温热泉中寻找耐热菌,这说明到环境中去寻找菌株要根据______________________________。 目的菌株对生存环境的要求 (2)某同学根据需要,配制了纤维素分解菌的培养基如下表,整个实验过程严格执行无菌操作。如果将其中的纤维素粉换成________,菌落数_____________________________,即可说明选择培养基的作用。 (3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,本实验宜采用____________法,原因是 __________________________________________________ 明显多于选择培养基上的菌落数 葡萄糖 稀释涂布平板 平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌 * . . . * . . . 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 专题2 微生物的培养与应用 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2) 脲酶 + CO2 NH3 + H2O (一)筛选菌株 一、研究思路 选择培养基 (二)统计菌落数目 (三)设置对照 活菌计数法(稀释涂布平板法) (一)制备培养基 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。 二、实验的具体操作 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2) 脲酶 + CO2 NH3 + H2O KH2PO4 1.4g NaHPO4 2.1g MgSO4 H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL。 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数——步骤一 (一)制备培养基 (二)土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,
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