实验二凝胶图像分析..docVIP

实验二：凝胶图像分析 姓名：李婉贞 班级：09药学1班 【实验目的】 本实验的目的是学会使用Gel-Pro Analyzer，进行DNA的定量、定性分析。 【实验过程】 DNA分析 （1）首先打开Gel-Pro程序，选择“DNA analysis”，点击“OK” 打开一张tif格式保存的图片，选择DNA，打开，避免错选图片，可进行预览 （2）若条带横向不是很水平，竖向不是很垂直，可以用“1D-Gel”工具栏上的“Rotate”进行旋转 点击“Lanes”进行泳道的选择 选好泳道后，进行“Band”选择，点击任意一条泳道，在光密度示图上就会出现该泳道上各个条带的光密度，如下图 (3)点击“M.W Standard”，进行内标的设置，点击“Reset”，选择分子量标记Marker的泳道。选择泳道后，对该泳道上的各个条带进行分子量标记。点击“New”，在“Name”输入“DL2000”,点击“Add”，依次输入“2000、1000、750、500、200、100”。 结果如下，点击“Auto Locate”，各个分子量自动标记到Lanel的对应条带上 （4）对各个泳道上的目的条带进行分子量的确定，点击“Results”，结果如下，黑字表示泳道各个条带的分子量，Gel-Pro定义每条泳道的总DNA含量是100ng，每个条带则依据亮度（光密度值）比例确认各个条带的ng数，也就是下图的蓝字所示： 【实验结果】 结果，以光密度值IOD表示 二、蛋白质电泳图分析 与DNA电泳图的分析差别没有太大的不同，只是实验类型选择“Protein analysis”。 三、杂交带分析 （1）实验类型选择“Dot blot analysis”，打开杂交图像 （2）点击“Dlots”，设定7×8的网格，在“Diameter”设置直径为45，将“Look Dots”选项设定为空，自行挪动生成的圆圈到杂交点上，点击“OK”，结果如下： （3）点击“Mass/IOD”进行各个杂交点的整合光密度值分析，结果如下： （4）菌落计数 （1）实验类型选择“Colony counting”，打开一个平底培养基的图像 （2）设定计数范围，点击“Select Area”，用鼠标在图像上选择一个圆形区域，如下图 （3）对菌落形态进行过滤选择，点击“Filter”，排除我们不需要的菌落类型，各种不符合规范的菌落种类已经给出，点击“Count”进行计算 可以看出，该平皿上的菌落都符合要求，共计10个