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高二生物选修专题课题微生物的实验室培养
【教育类精品资料】 培养基的分类和成分 自养异养微生物碳源的区别 比较消毒和灭菌 举例说明消毒和灭菌 制备培养基的程序 溶化操作中搅拌的作用 为什么将平板倒置 专题2 :微生物的培养与应用 了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。 一、课题目标: 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点: 三、技能目标: 课前预习 一、平板划线法 稀释涂布平板法 1. 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线 接种环 烧红 菌液中沾取一环菌液 迅速伸入平板内划3~5条平行线 第一区域划线的末端开始往第二区域内 最后一区域的划线与第一区相连 2.稀释 不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面 稀释度足够高时 9 试管灭菌 1 1 酒精 0.1 8~10s 均匀 转动培养面 分布均匀 二、临时 40c 甘油 -200c 预习自测: C D D D B 接种方法有: 平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面.在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落. 微生物的接种技术 (二)、纯化大肠杆菌 菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 一个菌落就是一个种群 菌落 细菌的菌落特征因种而异 (1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 操作的第一步灼烧接种环是 每次划线前灼烧接种环是 划线结束后灼烧接种环 是消灭接种环上的微生物 ; 消灭接种环上残留菌种 (使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。) 是防止细菌污染环境和感染操作者。 (2)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 (3)在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 (2)应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 (1)要注意防止杂菌污染,比如试管、移液管要经过灭菌,操作在酒精灯附近进行(移液管和试管口应在离火焰1-2cm处)。 问题探讨2 (1)培养未接种的培养基的作用是对照,若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底。 (2)原有培养基灭菌不彻底或杂菌污染。 * *
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