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红细胞血型检测 红细胞血型检测 第二章 红细胞血型检测 江西医学高等专科学校 目录 第一节 输血前免疫学检查 第二节 盐水介质试验技术 第三节 酶处理试验技术 第四节 抗球蛋白试验技术 第五节 聚凝胺介质试验技术 第六节 微柱凝集试验技术 第七节 吸收放散技术 第八节 凝集试验技术 第九节 红细胞血型分子生物学检测技术 学习要求： 1.输血前主要包括哪些内容？ 2.受血标本接受时的注意事项有哪些？ 3.ABO血型和RhD血型鉴定时的注意事项有哪些？ 4.交叉配血试验的影响因素有哪些？ 5.抗球蛋白试验的临床应用有哪些方面？ 6.红细胞血型分子生物学检测技术主要有哪些？ 第一节 输血前免疫学检查 目的：是输入的血液成分在受血者的体内发挥其有效作用. 在正常情况下，输入的红细胞在受血者体内不溶血，输入的的血浆成分不破坏受血者的红细胞。 主要程序：患者的病史和标本等的检查、核对及处理;ABO血型和RhD血型定型；红细胞同种抗体筛查和坚定；交叉配血试验；血小板输注前的抗体检查和配合试验；不规则抗体的筛选和鉴定；交叉配血结果的报告和发血等。 一、受血者标本的处理 （一） 标本的采集 输血除了需要达到预期的治疗效果外，必须确保输血安全。 血样由临床护士完成，因严格遵守一次只能为一位受血抽取标本，标本不得从输液管或输液侧筋脉中抽取。 （二）标本的接收 输血科技师接收血样标本时，应认真核对受血者的相关信息，尽可能了解受血者有无输血史、药物史、妊娠史等情况。如果有输血史，这有必要进一步了解最后一次输血的日期，若3个月内输过血，那么供血者的红细胞没有完全代谢消失，可能依然存在于血液循环中，导致血型定型试验中出现混合凝集的结果。 （三）标本的要求 1. 对输血前检查的血液标本应严格要求能代表受血者当前的免疫学状况，标本还需经鉴定和标记，保证其准确无误地来自受血者和供血者，应和血液申请单上的内容一致。 2. 防止受血者血液标本稀释和（或）溶血，若采集过程中发生溶血则不能使用。 3. 受血者配血试验对的血液标本必须是输血前3天采集的。 4. 若受血者使用右旋糖酐、PVP等治疗，应注意洗涤被检红细胞。 5. 每次输血后，受血者和供血者的标本必须保存于2~8℃至少7天。 二、受血者和供血者ABO和Rh定型 （一）、原理 根据红细胞膜表面上有无A 抗原或B抗原，将血型分为 A型、B型、AB型、O型4种。A型人血清中含有抗-B抗体，B型人血清中含有抗-A抗体，O型人血清中含有抗-A抗体和抗-B抗体，AB型人血清中不含ABO抗体。 正定型：用抗-A及抗-B试剂与被检红细胞反应，检测红细胞 表面是否存在A抗原或B抗原。 反定型：用标准A细胞及B细胞与被检血清反应，检测血清中是否存在抗体。 由于ABO血型系统抗体多数为IgM类，在室温盐水介质中就能出现明显的凝集反应。 二、受血者和供血者ABO和Rh定型 二、受血者和供血者ABO和Rh定型 1.ABO定型 最适的反应温度为4℃，但在室温反应良好，所以常规的ABO定型试验仅在室温进行。 (1)定型方法：正、反定型的试管离心方法目前仍被认为是最可信赖的ABO定型方法。 1)定型试剂：有些ABO血型诊断试剂是以人的血清汇聚而制成的，但必须具备以下条件： 第一，高效价(1：128)的IgM抗A或抗B。 第二，具较好的亲和性并不含冷凝集素。 第三，必需具有检测A2，A2B血型的能力。 第四，血清必须通过HIV，HCV，HBV等检查或经病毒灭活。另外一些ABO定型试剂是由来自培养细胞株的单克隆抗体所制成。 二、受血者和供血者ABO和Rh定型 　　2)ABO亚型的鉴定： ABO亚型的鉴定通常使用下列试剂：抗A、抗B、抗A1、抗H、抗AIA1红细胞、A2红细胞、B型红细胞和O型红细胞。有些工作者在定型试验中，常规地选择应用抗AB抗血清，以避免错误地把弱反应性A或B型红细胞分类为O型。一般抗AB试剂对Ax型红细胞可增加凝集反应的强度。 二、受血者和供血者ABO和Rh定型 (一)ABO定型试验中的常见问题：造成这种正反定型不一致的原因主要有： 1)技术和管理错误：这是