微型月季组培苗辐射诱导植株变异研究结题论文..docVIP

微型月季组培苗辐射诱导植株变异研究 周钦佩，陆锋，江夏伟 安徽农业大学园艺学院 230036 摘要：对微型月季组培苗辐射处理，有望利用组培和辐射的优势对微型月季从花苞、花型、株高、花香等观赏特性方面进行改良。本项目拟利用Co60γ射线对微型月季组培苗和扦插苗进行处理，通过对处理苗的常规培养，观察处理苗与对照苗生长状况的不同，从而筛选出优良变异植株。 关键词：微型月季，组织培养，辐射，变异 引言 微型月季是由中国小月季、多花月季以及小姐妹型月季杂交育成的，微型月季植株高一般不超过30cm。较其他类群现代月季而言，微型月季具有具有株型小，花形紧凑、耐寒能力强、开花时间长等特点，是一类很有发展潜力的室居装饰花卉。另外，在现代园林设计中，花期长、小巧玲珑，花形精美的微型花卉也越来越受到重视。微型月季作为一种微型花卉资源在市场开发中有着较好的前景，它可以用于地皮绿化、花坛和花篱构建的材料，还可成设于花架、布置于假山之上等，近年来发展很快。 微型月季在国内外的颇有发展，目前国外的微型月季的研究已经有一定的深度。我国微型月季起步较晚，优良品种基本由国外进口，价格昂贵。利用种子繁殖可应用于育种，但微型月季花型小，结实率低（一般每个蔷薇果只有1~2粒种子），创造新品种几率低，且耗时过长。 诱变育种由于方法简便、安全、经济，突变率较高（突变率一般可达到千分之几，有时可以达1/30，比自然突变率高100~1000倍，可引起植物形态结构和生理生化多方面的变异，而且产生的变异有的稳定很快，可在较短时间内育种新品种），更适合人们培育园林植物求新求异的特点，因此辐射诱变是目前园林植物品种培育与改良中的一种非常有效的手段。 本项目通过利用Co60γ射线对微型月季组培苗和扦插苗进行辐射处理，希望得到优良变异，通过对处理苗的常规培养和试管开花诱导，观察处理苗与对照苗生长状况的不同，从而筛选出优良变异植株。 1、试验材料与方法 1.1 材料 市售微型月季苗，琼脂，营养基质等 1.2 方法 1.2.1 组织培养 选用优质材料经消毒（见下表4第4组合）、无菌接种进行初代培养，所用培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。以继代培养基MS+6-BA1.0 mg/L +KT0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L进行继代培养。继而进行增殖培养，增殖培养中用到正交试验方法，具体组合见下表1。通过对照比较，筛选适宜增殖的培养基，对组培苗继续进行增值培养。另外，取优质微型月季叶片、茎段进行愈伤组织诱导。 1.2.2 盆栽苗扦插 选取优质盆栽微型月季苗，剪成含一到两个茎节约5-6cm的茎段，在经消毒过的基质中进行扦插，每两到三天浇一次水，以保证茎段切口湿润，从而使其生根良好。 1.2.3 Co60γ射线辐射 取生长良好的愈伤组织和长势良好的扦插苗分三组进行辐射，具体剂量如下： 表1：辐射处理组合 组别 1 2 3 处理（Gy） 25 30 35 2、试验结果与分析 2.1具体实验进程及观察结果 2009年6月底开始着手进行试验，首次选用优质材料经消毒（见下表3第4组合）进行初代培养，所用培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。一周后，转接进行继代培养，所用培养基为MS+6-BA1.0 mg/L +KT0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L。经过56天的继代培养，组培苗平均高度达到4cm，且均生有嫩芽，并有两株在三角瓶内已成花，但多数已表现出一定的缺养，处于饥饿状态。 9月7日，进行了第二次转接，进行增殖培养。由于希望在微型月季组培苗增殖培养过程中观察到不同的生长现象，研究不同激素对组培苗生长、生根及新生芽发生的影响，我们运用正交设计设置了6-BA（0.5、1.0、1.5 单位mg/L，下同）、NAA（0.05、0.10、0.15）、KT（0.4、0.5、0.6）、IBA（0.05、0.10、0.15）四个激素的不同浓度组合，以期筛选出最佳的增殖培养方案。组合如下： 表2：四种激素正交组合 组别 6-BA NAA KT IBA 1 0.5 0.05 0.4 0.05 2 0.5 0.1 0.5 0.1 3 0.5 0.15 0.6 0.15 4 1.0 0.05 0.5 0.15 5 1.0 0.1 0.6 0.05 6 1.0 0.15 0.4 0.1 7 1.5 0.05 0.6 0.1 8 1.5 0.1 0.4 0.15 9 1.5 0.15 0.5 0.05 对以上各组实验的观察记录如下: 表3：对9个试验组合的观察 观察日期 2009-10-12 2009-10-19 2009-10-27 2009-11-10 2009-11-19 组别 生长 状况 1 均有不同程度的黄化，