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- 2017-01-13 发布于湖北
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吸光光度法 2003年5月 教学目标 紫外-可见分光光度法简介 一、光的基本性质 2、单色光、复合光与光的互补 三、紫外-可见分光光度法的基本原理 1、朗伯—比耳定律 关于K: K 的物理意义:单位厚度、单位浓度溶液对一定波长光的吸光度。 与溶液性质、温度和入射光波长有关。 K越大,吸收能力越强,灵敏度越高。 K与浓度单位之间的变化关系(P9) 摩尔吸光系数ε 吸光物质的特征常数;在最大吸收波长λmax处,常以εmax表示 。 在温度和介质条件一定时,ε 仅与吸光物质的结构与性质有关,可作为定性鉴定的参数; 不随浓度c 和光程长度b 的改变而改变:ε=A/b c?。 ε 在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 吸光能力与测定灵敏度的度量; εmax越大表明该物质的吸光能力越强,测定的灵敏度越高。 ε 105:超高灵敏 ε =(6~10)×104:灵敏 ε104:不灵敏 2、应用朗伯—比耳定律时应注意的问题 3、朗伯—比耳定律的应用 吸 收 曲 线 标准(工作)曲线 朗伯—比耳定律的偏离 偏离原因 标准曲线的线性 四、紫外-可见分光光度法分类 紫外-可见分光光度法的特点 五、紫外-可见分光光度计 2、紫外-可见分光光度计的类型 3、紫外-可见
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