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化妆品中金黄色葡萄球菌的检测 一、实训目的 熟悉化妆品中金黄色葡萄球菌的检验原理 掌握化妆品中金黄色葡萄球菌的检测方法 能够规范书写检验原始记录及检验报告 二、实训原理 是人类的一种重要病原菌,隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus),有“嗜肉菌”的别称,是革兰氏阳性菌的代表,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌广泛分布在土壤、水、空气及物品上,人和动物的皮肤及与外界相通的腔道也常有。 金黄色葡萄球菌的形态与结构 金黄色葡萄球菌一般为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。 金黄色葡萄球菌 营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37°C,最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。 四、实训程序 1、仪器的准备于清洗 2、试剂、稀释液和培养基的配制 3、金黄色葡萄球菌检查程序。 四、实训试剂与培养基 稀释液 SCDLP液体培养基 7.5%的NaCl肉汤 Baird Parker 平板 增菌剂 血琼脂培养基 甘露醇发酵培养基 兔(人)血浆制备 革兰氏染色液 五、检验报告 1)按常规程序检验,凡分离出革兰氏阳性葡萄球菌的疑似菌落,经证实可发酵甘露醇、血浆凝固酶阳性的菌株,可报告检出金黄色葡萄球菌。 2)如果分离的疑似菌落不发酵甘露醇,但血浆凝固酶阳性也可断定为检出金黄色萄葡球菌。 3)分离出的葡萄球菌疑似菌落,不发酵甘露醇、血浆凝固醇阴性,判断未检出金黄色葡萄球菌。 * * * * 2007年版《化妆品卫生规范》中规定每克或每毫升化妆品中不得检出金黄色葡萄球菌 被金黄色葡萄球菌感染 确定仪器的种类、数量与规格 洗净、包扎、灭菌,备用 确定试剂及规格, 实训用量 按用量配制试液、 稀释液和培养基 按要求分装,包 扎贴标签、 灭菌、备用 供试液 的制备 增菌 培养 划线 分离 血琼 脂平板 营养 肉汤 革兰染色、镜检 甘露醇发酵试验 血浆凝固酶实验 书写检验 记录单 溶血现象
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