新·分子吸收分光光度法在定量分析中的应用.docVIP

分子吸收分光光度法在定量分析中的应用 (基于上海元析光度计) 分子吸收分光光度法是一种常用的仪器分析方法，它是过通被测物质对特定波长光的选择性吸收来进行定性或定量分析。分子暖收分光光度法按光源波长的不同可分为红外吸收光谱部分与紫外和可见光部分。本文只叙述有关分子吸收分光光度法紫外和可见光部分(以下简称分光法)在定量分析中的一些问题。由于目前化学试剂标准中采用此 法多用于定量分析， 所以本文就主要以化学试剂标准方法为唰进行探讨。 分光法在化学试剂分析中的应用简况 品 名 瓤试项目 偶氨砷I 含量，对铀灵敏度 偶氯砷皿 对铀灵敏度 卜f2一吡啶饵氨j 2-萘酚 对铜灵救度 =苯氨基碌 对铬酸盐灵敏崖 锥菲罗啭盐酸盐 对铁灵敏度 苯骈威三酮 对氨基醒灵教度 间甲酚紫 含量 澳甲酚绿 含量 甲酚红 含量 酚酞 质量吸收系数 澳酚蓝 质量吸收系数 澳百里香酚蓝 质量吸收系数 百里香酚蓝 质量吸收系数 d (2一毗啶偶氰】一间苯二酚 对钴夏敏度 船菲罗啉 对链灵敏度 以及草酸盐、铝、砷、铁、羧基化合物、磷酸盐、硅酸盐等国家标准测定通则。从以上粗略统计看分光法在化学试剂分析领域中应用面还不算太广， 但随着分光光度计仪器本身的不断改进以及测试方法的不断研究， 尤其是分光光度计与计算机的联用将使分光法的应用有比较广阔的发展前景。 2． 在分光法定量测试中应该注意的问题 2．1分光法测试的依据一～ 朗伯一比尔定律中的几个因素 2．1．1分光法测试的基本原理是朗伯一比尔定律。它的公式为： 式中I A —— 吸光度： ——入射光通量， ——透射光通量， 一一吸收系数| b 一一光路长度， c ——溶液中待测物质浓度。 当光路长度b与吸收系数 一定时，吸光度A与溶液中待测物质浓度c成正比， 这是分光法定量分析的基础， 所以本文就此公式在化学试剂方法通则中的表述方法进行探讨。 2．1．2吸收系数 在原化学试剂部颁方法通则中有两种表述方法： 百分吸收系数( )： 当溶液浓度为1 时，光路长度为lcm时的吸光度。克分子收吸系数(e)：当溶液为1克分子浓度时，光路长度为Icm时的吸收度。而在化学试新基础标准(国标，1988~中只规定了1种表示方法是：摩尔吸收系数():厚度以厘米表示， 浓度以摩尔每升表示的吸收系数， 单位为L／cm·mol。笔者认为只这一种表示方法是不够的，随着分光方法的改进，需要增加一种表示方法就是：质量吸收系数质量吸收系数(a) ： 厚度以厘米表示， 浓度以克每升表示的吸收系数， 单位为L／cm·g。例如现已被采用为国家标准的酚酞，澳酚蓝等都是采用这种方法表示的 2．1．3光路长路b 公式中b系指光路长度， 这在理论上是正确的， 但是实际上是以吸收池的两个平行的内表面之间酌距离(cm)，即厚度度L来表示的。严格地讲，光路长度b与厚L可能有差异， 如吸收池两个表面间的平行度，及以溶液的折射差异等等， 都会造成b与L之间的不等。但实蕲上， 只要吸收池是合格品， 而且匹配一致， 一般来说b与L之间的差异可见忽。略不计。虽然在分光方法通则中出现了两个术语光路长度b与厚度L， 但在计算式中注有b---光路长度(即吸收池厚度)一语。 2．1．4溶液中待测物浓度c 朗伯一比尔定律中虽表明吸光度和浓度间成正比关系，但只有在稀溶液时才能成立。因为如果浓度较高， 溶质的质点之间的平均距离缩小到一定程度， 邻近质点的电荷分布会受到影响，这种影响能改变其对光的吸收特性。某些化合物会随溶液浓度增高而产生聚合形态， 以甲基蓝为例(简写为MeBI) ， 会随浓度增高而形成=聚， 三聚形态: 其中tMeB1最大吸收波长约在660nm处，(MeBI) 的最大吸收波长约在610nm处，而三聚态(MeBI)3的最大吸收波长则变至$80nm处。上述这些现象的存在会导致吸光度与浓度之间的线性关系发生偏差。同时，严格说来， 如果浓度增大而导致溶液折射率改变，也会影响吸光度与浓度之间的线性关系，但在实际上， 当被测物浓度≤0．01moI／L时， 这种影响是不存在的。所以， 当制定分光定量测试方法时， 对摩尔吸收系数较小的物质一般都宜采用增大试样浓度使其吸光度值增大，以便于测定。但这时，一定要做工作曲线， 以检查是否偏离了朗伯一比尔定律 2．1．5在用分光法进行定量分析时， 对吸光度A的范围限制在分析测试时， 如果仪器检测器受到的光信号特别强或特别弱时， 仪器检测器的错误响应就会频繁出现， 当被测物溶液对光的透射比过大或过小时，吸光度值A就会太小或太大， 此时，仪器的错误喃应就会出现， 这种情况下所得到的吸光度测量值都是不准确的。由于这种原因对测试结果带来的误差是随机的， 所以只能采用限制吸光度A值的使用范围以减小误差。通过计算可证实， 当A=0．43