某注射用凍干粉针产品中维生素E含量的测定.docVIP

摘要 目的：采用气相色谱方法对公司生产的某注射用冻干粉针产品中的维生素E的含量进行检测并对此分析方法进行验证。方法：气相色谱法，采用氢火焰离子检测器（FID）检测。结果：用气相色谱法测定维生素E含量的方法专属性好；检测限为3 μg/ml；定量限为15μg/ml；当维生素E浓度在15.54 μg/ml～310.8 μg/ml范围内呈良好的线性关系，回归方程为y= 2022.8x + 590.3，R2 = 0.9988；平均回收率在80%～120%之间，RSD≤5%；重复性为2.3%，中间精密度为1.1%；该方法的耐用性良好，理论塔板数≥3000，RSD≤2.0%。结论：用气相色谱法检测维生素E的含量，操作简便，结果准确，精密度好，耐用性好。 关键词：维生素E、气相色谱法、含量测定方法验证 目录 引言 4 一、材料与方法 5 （一）仪器 5 （二）试剂 5 （三）实验条件 5 1. 色谱条件 5 2. 对照品溶液的配制 5 3. 样品溶液的配制 5 二、实验部分 5 （一）系统适用性 5 （二）专属性 6 （三）检测限和定量限 7 （四）线性 7 （五）准确度 8 （六）精密度 9 （七）范围 10 （八）耐用性 10 三、讨论 11 四、结论 12 五、参考文献 12 引言 维生素E是维生素中的一种，具有重要的生理活性，应用广泛，具有抗氧化作用，也能抗不育症，因此又被称为生育酚。维生素E测定方法的研究进展迅速，目前的分析方法已经多达十几中，各方法均有其自身的优缺点、灵敏度、检测限度等，如有正相和反相高效液相色谱法，毛细管气相色谱法，比色法，荧光法，薄层分析法[3]，示波滴定法和红外光谱法等。 气相色谱法是对多组分中某一成分进行定量和定性分析非常好的方法。该法广泛应用在维生素E的定性和定量分析方面，具有操作相对简单，快速，准确的优点，且具有高度的选择性，能够分离维生素E的多种异构体和杂质，选择性地测定维生素E。若采用内标法则不受进样量和操作条件变化对结果的影响。欧洲药典（EP））E 的含量测定，中国药典2010 版二部（CP）采用气相色谱法测定其原料及其制剂。 此次研究就以美国药典35版和ICH指导原则为参考依据，采用气相色谱法来检测维生素E并进行方法验证。 在验证过程中将对如下分析检测项目进行评价：系统适用性，专属性，定量限检测限，线性，准确度，精密度重复性中间精密度，范围耐用性。实验考查的各个内容下测出的数据均能符合相应的要求，维生素E）N,N-二甲基甲酰胺HP-50+毛细管色谱柱（直径0.53㎜，涂膜厚度0.5μm，柱长30.0米），检测器：FID， 柱温：260℃ ，进样口温度：320℃，检测器温度：350℃，载气：氮气，载气流速：6.0 ml/min，尾吹流量：30 ml/min，分流比：1/10，空气流速：400 ml/min，氢气流速：40 ml/min，进样量：1μl。 N A1 A2 A3 A4 A5 A6 平均值 RSD(%) 5930 313222 306148 304214 304703 309318 304659 307044 1.2 （二）专属性 分别配制空白溶剂，空白辅料溶液，样品溶液和对照品溶液的配制参照对照品溶液的配制和样品溶液的配制项下方法。 按系统适用性项下方法进行系统适用性实验，再将所配制的溶液各进1针，记录色谱图。每进样12针样品溶液和在进样序列结束时分别进1针对照品溶液。 结果显示，对照品中维生素E的色谱保留时间为8.656min，空白溶剂，空白辅料和样品溶液的色谱图中维生素E峰附近均没有干扰峰，则表示溶剂和辅料对维生素E的测定没有干扰（见图1）。 （三）检测限和定量限 定量限溶液的配制：精密移取维生素E对照品溶液5ml到50ml容量瓶中即得，浓度约为15 ug/ml。 检测限溶液的配制：精密移取定量限溶液5ml到20ml容量瓶中即得，浓度约为3 ug/ml。 按系统适用性项下方法进行系统适用性实验，定量限溶液进6针，检测限溶液进3针，记录色谱图，计算信噪比和平均峰面积。 每进样12针样品溶液和在进样序列结束时分别进1针对照品溶液。 结果见表2和表3： 表 2 定量限结果 A1 A2 A3 A4 A5 A6 平均值 RSD% 维生素E31514 31855