植物組织培养产业化生产技术要点(电子版).docVIP

植物组织培养产业化生产技术要点 刘良宏1 李 斌2 胡广益1 王 玲3 （1湖北省咸宁市园林绿化管理局 湖北 咸宁 437100 2湖北省咸宁市建设委员会 湖北 咸宁 437100 3 湖北省咸宁市农业科学研究所 湖北 咸宁 437100） 摘 要：植物组织培养已经成为现代园艺领域中，作为种苗的主要生产方式之一，其优势明显，在我国已经形成产业化生产模式。植物组织培养产业化技术流程划分为stage0、stageⅠ、stageⅡ、stageⅢ1 引言 植物组织培养，又称植物克隆或植物微繁，是从上世纪30年代初期发展起来的一项重要生物技术，目前已经成为现代园艺领域中，种苗繁殖不可或缺的又一种手段。1902年德国著名植物生理学家Haberlandt提出了植物“细胞全能性”这一概念，经过半个多世纪的探索和发展，这一理论被越来越多的实验所证实。1960年，Morel提出了离体无性繁殖兰花的新方法，其繁殖系数之高，可谓始料不及，于是很快被兰花生产者所采用，从而在西方迅速建立起了“兰花工业”。可以说，这是植物组织培养技术第一次在园艺作物上形成规模化的生产应用。目前全世界许多国家都拥有离体快繁的专业公司，如荷兰，既是一个花卉生产出口的大国，同时也是植物组培苗的生产王国，其每年出口花卉种苗达5000万株以上。我国也不乏组培苗生产的专业公司，目前年生产总量约2亿株，其中近一半用于出口。从花卉种苗的生产情况来看，全世界将近80%的种苗均来源于组织培养。 植物组织培养，作为种苗的主要生产方式之一，具有明显的优点：(1)繁殖速度快，尤其适宜于新、优、特品种推广的需要；(2)不受季节限制，可全年生产；(3)植物性状一致，生长势旺，尤其是作为盆栽植物，丛生性强，丰满度高，具有更强的观赏性；(4)可防止种质退化，是去除病毒病害的一种有效手段；(5)作为品种改良的一个重要手段；(6)可极大地方便种苗出口。基于上述优势，植物组织种苗培养的产业化，日益成为许多园艺企业热衷投资的方向之一。 2 植物组织培养产业化的概念 所谓植物组织培养产业化，是指将植物组织培养技术成功地应用于某种或多种植物的离体繁殖实践之中，使这一生产过程的各个环节（人、机、料、法、环等）得到有效控制，从 而形成一系列标准化的生产工艺、达到一定的生产规模、并取得良好效益的生产活动。 需要从下面几个方面理解这一概念：(1)生产技术相对成熟；(2)生产过程应该标准化；(3)生产达到一定的规模（有别于实验室研究）；(4)产品质量标准化；(5)取得良好的经济效益。 3 植物组织培养产业化技术流程及其控制要点 3.1技术流程 作为产业化的组织培养过程，其技术流程通常可划分为四个阶段：外植体及其预处理阶段、原种研发与驯化阶段、继代增殖阶段、生根收获阶段，我们习惯分别用stage0、stageⅠ、stageⅡ、stageⅢ表示。 stage0 stageⅠ stageⅡ stageⅢ 3.2控制要点 3.2.1 外植体材料预处理 在组织培养中，我们把由活植物体上切取下来得以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体（Explant），被切割的活植物体则称之为母本（Mother plants；Stock plants）。在建立无菌培养体系之前，通常需要对母株和外植体进行必要的预防处理。预处理的目的有两个方面，一是降低污染，提高外植体的无菌成活率；二是打破外植体的休眠，提高外植体的诱导成功率。对于母本植株，通常的处理方法有干燥法、凉晒法、地苗盆栽法、药剂处理法。有些植物的种胚或芽，存在休眠期的问题。为了适当进行培养，必须采用人工方法打破其休眠期，从而提高外植体诱导成功的机率。外植体常见的预处理方法有：低温处理法和化学试剂解除法。 3.2.2 外植体的选取 组织培养能否成功，除培养基的成分和激素的调节选择之外，外植体选择是否合理，是另外一个最重要的因素。根据植物细胞的全能性，从理论上讲，植物的每一个细胞都具有再生新植株的可能性，因此，任何器官，组织或细胞都能作为外植体，但是，实事表明，不同品种、不同的器官或组织，其分化能力存在着巨大的差异；甚至植物不同部位的同一器官或组织之间，其差异也极为显著。外植体的大小和采集时间也是影响的组织培养能否顺利进行的制约因素。概括起来外植体的选取，通常需要从外植体的来源、取材时期、取材大小、外植体的生理年龄或取材部位四个方面加以考虑。 来源：一般说来器官到器官相对容易；但也有例外；存在着一种条件化效应(Conditioning effect)，即从培养条件下的植物上取得的外植体，其形态发生能力会大大增强。如用试管中的百合鳞茎(Lilium auratum)作外植体进行培养，则100%再生出鳞茎；出瓶炼苗不久的红掌(Anthurium)组培种苗为外