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根和根际的研究方法 第一节 根系研究法 二.影响根系生长的因素 三.根系研究方法 (一)钉板法 (二)容器法(根籍或根箱法) (三)玻璃壁或玻璃管 (四)同位素法 (五)多孔膜法 四.根参数 第二节 根际的研究方法 二.根际研究的难点 三.研究方法 (二)根际土壤特性的研究方法 1.根际土的直接采集法 2.根际土壤的冰冻切片法 3.放射性自显影法 4.微电极法 5.电子探针法 第三节 VA菌根的研究方法 二.VA菌根在植物营养中的作用 三.VA菌根的研究内容 四.研究方法 (二)植物根系被菌根侵染程度的定量分析 (三)VA菌根的繁殖与菌种保持 1.菌根扩大了根系吸收面积,明显增加植物对养分吸收,特别是土壤中移动性较差的磷素, 机理:菌丝吸P的Km小,可以在很低P浓度溶液中吸P,菌丝表成的磷酸酶促进有机磷水解,菌根改变阴/阳离子吸收平衡,引起pH改变。 对迁移较慢的S、Cu、Zn、Ca、Fe等也有增加吸收的功能。 2.有利于豆科作物结瘤固氮:在严重缺磷土壤,若无菌根,三叶草不能结瘤。 3.菌根对某些重金属(Zn、Mg)的吸收有抑制作用 4.抗逆性:病、旱、高温、盐。 5.环境条件对真菌侵染的影响:pH、养分含量 6.其它微生物与菌根真菌的协同或拮抗作用 7.菌根真菌的生物学特性:VA菌根在脱离宿主植物条件下还不能单独进行纯培养基繁育,如何通过人工培养基扩大繁殖是该领域的一个前沿课题。 1.选择侵染力强的高效菌种:不同VA菌根真菌对作物侵染程度不一,对缺P或固P严重土壤可能产生明显增产效果。 2.宿主对菌根的依赖性: 指标:(带菌根的植物干重—无菌根植物干重)/带菌根植物干重*100 最高:具粗根胡萝卜 很高:豆科、韭、洋葱 较低:马铃薯、蕃茄 很低:燕麦、小麦 为零:包心菜、甜菜 植物接种菌根提高作物产量的先决条件: 缺磷土壤,对菌根依赖性大的作物,土壤中原来缺少菌根或原有菌根效率低。 (一)孢子的提取 VA菌根的繁殖体包括:孢子、孢子果、泡囊、菌丝等 它们任何一个或多个均可对植物根部进行侵染;多种繁殖体构成“混合繁殖体”,其侵染速度快;但不易获得“纯”种,为了获得纯种,常提取VA的孢子进行接种,而菌丝等易与其它真菌混淆。 由于目前VA菌根真菌脱离宿主植物均无法进行单独培养,故要获得该真菌必须从种殖了宿主植物的田间或温室盆栽土壤中提供。 1.湿筛和倾注法 土壤—1升水—搅拌后沉降数秒——上部悬浊液——粗土筛(孔径500-800um,除去不沉降的大有机质颗粒)——搅拌后细筛(38-250um)——冲洗筛面——筛面上残留物即含有大量孢子 2.蔗糖离心法 (1)取土:100-500ml, (2)过粗筛:去除大粒土,浸泡后的土壤用水洗过20目筛。 (3)沉降:沉降筒中沉降30秒,孢子存在于上部悬浊液中。 (4)过细筛:前悬浊液过270或325目筛。 (5)离心:将(4)中烧杯中的悬浮液转入离心管,1800rpm离心5mins,倾去上清液。 (6)加入蔗糖离心:(5)中离心管中加入45g/l蔗糖液,搅匀,再离心。孢子悬浮天溶液中,土粒沉降。 (7)过筛(325目):(6)中上清液过325目筛,收集孢子。 1.根系样本的采集:采集的样本可随时观察或FAA固定放置待用。 2.侵染根的染色和制片 3.根系侵染的定量分析 (1)直线截获法:计算根侵染部分长度和根样本总长,计算侵染率 (2)载玻片法:高倍显微镜下直接观察每个样本侵染部分根长及总长,求多个样本平均值。 * 一.根系在植物生长中的作用 1.固定植物:摄取、运输、贮藏营养物质,合成有机物质如氨基酸等 2.植物地上部分根系生长是相互依赖、彼此协调 (1)如:如果剪去菜豆的一半叶片或一半根系,只要保留两部分分生组织完整,则过一段时间后根/冠比又会恢复至原来数值。 (2)原因:根系向地上部输送矿质养分和水分, 地上部向根系提供碳水化合物,根系合成部分有机物,然后输送到地上部 研究影响作物根系生长的因素,进而调节这些因素,使之达适宜水平,促进根系生长,从而促进整个植株生长,最终获得理想的产量。 植物根系的生长和形态特征,主要取决于植物的遗传特征,不同植物,甚至同一植物不同品种,其根系形态特征都会有很大差异,外界环境,特别是土壤环境对根系生长也会产生很大影响。 (一)化学因素: 1.养分供应:根系具有趋肥性 2.低pH与毒害元素: Al、Mn、Fe、B (二)物理因素: 1.机械阻力 2.水分 3.通气 4.温度 (三)生物因素:一般情况下,根际微生物的存在减少植物的主根和侧根长度,减少侧根数量,并使根毛长度的密度减少。 根系研究:形态学:根数、分布、根重、根茎
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