b区缺失的人凝血因子ⅷ基因在293t细胞表达.docVIP

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2017-01-15 发布于天津
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区缺失的人凝血因子基因在细胞表达作者程海徐开林孙海英杜冰曾令宇鹿群先何徐彭潘秀英摘要本研究目的是构建含有人凝血因子基因的慢病毒载体观察其在细胞中的表达情况用限制性内切酶法获得区缺失的人凝血因子基因片段将其克隆至慢病毒载体构建了慢病毒表达载体用限制性内切酶法鉴定载体的连接方向用磷酸钙共沉淀法将重组质粒分别与包装质粒包膜蛋白质粒共转染包装细胞包装后感染细胞并以作为对照在感染后用逆转录聚合酶链反应检测基因的转录一期法检测细胞培养上清的活性流式细胞仪检测载体的感染效率检测基因的整合结果表明成功构建了慢病

B区缺失的人凝血因子Ⅷ基因在293T细胞表达 nbsp; 作者：程海，徐开林，孙海英，杜冰，曾令宇，鹿群先，何徐彭，潘秀英【摘要】nbsp; 本研究目的是构建含有人凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因的慢病毒载体，观察其在293T细胞中的表达情况。用限制性内切酶法获得B区缺失的人凝血因子Ⅷ基因(BDDhFⅧcDNA)片段,将其克隆至慢病毒载体pXZ208，构建了慢病毒表达载体pXZ208BDDhFⅧ；用限制性内切酶法鉴定载体的连接方向，用磷酸钙共沉淀法将重组质粒pXZ208BDDhFⅧ分别与包装质粒ΔNRF、包膜蛋白质粒VSVG共转