ilkmrna在结肠癌细胞株中的表达及其稳定表达的rna干扰载体构建.docVIP

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2017-01-15 发布于天津
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ilkmrna在结肠癌细胞株中的表达及其稳定表达的rna干扰载体构建.doc

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在结肠癌细胞株中的表达及其稳定表达的干扰载体构建摘要目的检测结肠癌细胞株中的水平并构建针对基因的特异性干扰表达载体方法通过检测基因在三种结肠癌细胞株及的表达根据提供的基因序列设计具有小发夹结构的两条序列化学合成后经退火形成双链片段连接到经酶切线性化的质粒上形成重组载体转化大肠杆菌提取质粒经双酶切鉴定和测序鉴定稳定转染结肠癌细胞结果检测基因在三种结肠癌细胞株中均有表达电泳条带强度比为为为成功构建了针对基因的特异性干扰载体和对照的无关基因载体并稳定转染结肠癌细胞株结论成功构建了针对基因的特异性载体并

ILKmRNA在结肠癌细胞株中的表达及其稳定表达的RNA干扰载体构建【摘要】nbsp; 　　［目的］检测结肠癌细胞株中ILK的mRNA水平，并构建针对ILK基因的特异性RNA干扰(RNAi)表达载体。［方法］通过RT-PCR检测ILK基因在三种结肠癌细胞株（SW480、LO-VO及HT29）mRNA的表达；根据GenBank提供的ILK基因mRNA序列，设计具有小发夹结构的两条DNA序列，化学合成后经退火形成双链DNA片段，连接到经HindⅢ／BglⅡ酶切线性化的pSUPER-neo-EGFP／H1（pSNE/H1）质粒上，形成重组载体p