内障丸对抗精子抗体阳性大鼠子宫一氧化氮合酶表达的影响.docVIP

内障丸对抗精子抗体阳性大鼠子宫一氧化氮合酶表达的影响 【摘要】nbsp; 目的 探讨内障丸对抗精子抗体阳性大鼠子宫一氧化氮合酶表达的影响。方法将Wistar 雌性成年大鼠随机分为6组。中药低剂量组（内障丸）、中药高剂量组（内障丸）、中药对照组（六味地黄丸）、西药对照组（醋酸泼尼松片）、模型组、空白组。从第1次免疫后1周开始给药，连续3周。之后检测内障丸对妊娠第3天大鼠子宫一氧化氮合酶表达的影响。结果内障丸可明显提高大鼠交配后第3天子宫一氧化氮合酶表达，提高大鼠的窝产仔鼠数。结论 内障丸能改善子宫内环境，有利于受精卵着床。 【关键词】nbsp; 内障丸 抗精子抗体 一氧化氮合酶 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the expression of iNOS in uterus of antisperm antibody rats treated by NeiZhang pill.MethodsMaturate femal wistar rats were randomly divided into 6 groups:NeiZhang pill low dose group;NeiZhang pill high dose group;Liuweidihuang pill control group;Prednisone control group;model group;normal group.Therapy began after the first immune and the expression of iNOS was measured after 3 weeks therapy.ResultsNeiZhang pill could promote the expression of iNOS in uterus and enhance the fetiferous number.ConclusionNeiZhang pill can improve internal uterus environment,facilitate fertilization and implantation. 　　Key words：NeiZhang pills;nbsp; Antisperm antibody;nbsp; iNOS nbsp;nbsp;nbsp; 抗精子抗体（AsAb）阳性不孕约占不孕患者的20%～30%，具有较高的发病率。AsAb可以通过不同的环节影响生殖过程导致不孕和流产。本实验通过观察内障丸对AsAb阳性大鼠受孕后子宫一氧化氮合酶（iNOS）的影响，探讨内障丸对子宫iNOS的作用机制。为中药治疗AsAb阳性流产及不孕提供理论依据。 　　1nbsp; 材料与方法 　　1.1nbsp; 材料 　　1.1.1nbsp; 动物 nbsp; 　　Wistar 雌性成年大鼠，体重（180±10）g,鼠龄10周，成年雄性Wistar大鼠，体重（250±20）g，购自黑龙江中医药大学实验动物中心。 　　1.1.2nbsp; 药物 　　内障丸，6 g/袋，黑龙江中医药附属第一医院制剂室提供，批号：031016。六味地黄丸，0.2 g/丸，每丸相当于原药材3 g，吉林济邦药业有限公司产品。醋酸泼尼松片nbsp; 5 mg/片，上海信谊药业有限公司产品。硫酸庆大霉素nbsp; 8万u/只，批号031026，上海第一生化药业公司产品。 　　1.1.3nbsp; 试剂nbsp; 　　鼠抗人精子抗体酶免试剂盒由北京华美生物技术公司提供，实验所需其它化学试剂耗材均由哈尔滨市医药公司化学试剂批发站提供。 　　1.2nbsp; 方法 　　1.2.1nbsp; 精子膜抗原提取 nbsp; 　　取正常人精液弃精浆，PBS离心洗涤5次，混悬于含0.5%NP-40的Tris-HCl缓冲液，置4℃放置1 h。12 000 r/min离心30 min，取上清到透析袋，以PBS过夜透析，双缩脲法测蛋白浓度，-20℃保存备用。 　　1.2.2nbsp; 动物模型建立［1］nbsp; 　　用提取的膜抗原伴等体积弗氏完全佐剂，将二者充分研磨混匀，并加入硫酸庆大霉素10U/只。对除空白组外所有大鼠进行双侧腹股沟处多点皮下注射，每只大鼠注射原量为0.4 ml，2周后用精子膜抗原加等体积不完全佐剂，对除空白组外所有大鼠进行双侧腹股沟处多点皮下注射，进行加强免疫每只大鼠注射抗原剂量同上次。1周后，用精子膜抗原再次双侧腹股沟处皮下多点注射。空白组大鼠于相应时间于相同位置多点注射等体积生理盐水。 　　1.2.3nbsp; 分组及