冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞cne2的抑制作用.docVIP

冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞CNE2的抑制作用 nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp; 作者：朱国臣，肖大江，张亚男，吴四海，袁渊，黄红宇，魏云玉 【摘要】nbsp; 目的探讨冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞CNE2的抑制作用，为其临床应用提供理论依据。方法SRB法检测冬凌草甲素对CNE2细胞生长的抑制作用，流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡的发生。结果冬凌草甲素抑制CNE2细胞的生长，引起细胞死亡；冬凌草甲素诱导CNE2细胞发生凋亡和坏死，流式细胞分析发现“亚G1期峰”；冬凌草甲素作用后CNE2细胞的G2/M期比例增多。结论 凋亡和坏死同为冬凌草甲素抑制CNE2细胞生长的机制，可能与改变细胞周期有关，且具有浓度依赖性。 【关键词】nbsp; 冬凌草甲素； 鼻咽癌； 凋亡； 坏死 　　Abstract：ObjectiveTo find more effectively chemotherapeutic agents and treatment regimens, we studied inhibiting effects of Oridonin on human nasopharyngeal cancer line CNE-2. MethodsCell growth inhibition mediated by Oridonin on CNE-2 cells was investigated by SRB assay. The effect of Oridonin on apoptotic induction in CNE-2 cells was determined by flow cytometry . ResultsThe growth of human nasopharyngeal cancer line CNE-2 was significantly inhibited by Oridonin in vitro, and the inhibition rates increased by increasing Oridonin concentration, and death cells were mainly necrotic cells and apoptotic cells . “SubG1” phase peak was found using flow cytometry . Oridonin could cause CNE 2 cells cycle to change. With the increase of drug concentration, G2/M phase cell percentage increased. ConclusionApoptosis and necrosis are the key mechanism for Oridonins killing action in human nasopharyngeal cancer line CNE 2, which is partly due to change of cells cycle ,and appear to be dosedependent. 　　Key words：Oridonin;nbsp;nbsp; Human Nasopharyngeal Cancer；nbsp;nbsp; Apoptosis；nbsp;nbsp; Necrosis nbsp;nbsp;nbsp; 冬凌草甲素(oridonin)是从冬凌草中提取出来的有效抗癌成分，其主要化学结构是一种四环二萜类化合物，有研究表明其对白血病以及食管癌、肝癌、结肠癌等有一定的疗效［1～4］。本研究通过SRB法检测细胞存活率、流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡的发生等手段观察冬凌草甲素对于人鼻咽癌细胞CNE2株的抑制作用，以期为临床应用提供理论依据。 　　1nbsp; 材料和方法 　　1.1nbsp; 材料和仪器 人鼻咽癌细胞系CNE2购于中国科学院上海细胞生物所，冬凌草甲素（纯度＞98%）购于中国科学院昆明植物研究所，Annexin V凋亡检测试剂盒购于Biovision公司， PI（碘化丙啶）购于Sigma公司，荧光显微镜为Leica公司产品，流式细胞仪为Beckman Coulter公司产品。 　　1.2nbsp; 细胞培养细胞培养基为RPMI1640（美国Gibco BRL公司），补充10%胎牛血清（杭州四季青公司）、100IU/ml青霉素和0.1 mg/ml链霉素。细胞培养用50 ml培养瓶，置于37℃，5% CO2培