簡单测定种子的生活力.docVIP

8种 子 生 活 力 测 定 Z—1概述 种子生活力（Seed viability）是指种子发芽的潜在能力。种子生活力测定在农业生产上具有重要的意义：①测定休眠种子的生活力。许多植物种子因存在休眠，暂时不能萌发，因此发芽率很低，尤其是新收获的和野生性较强的种子，必须进行生活力测定，才能了解种子的发芽潜力，以便合理利用种子。播种前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理。种子检验时，若发芽试验末期有新鲜不发芽种子或硬实种子，也应接着进行生活力测定，以正确评定种子品质。②快速预测种子的发芽力。休眠种子可借助于各种处理措施打破休眠，然后进行发芽试验，但所需时间较长。而种子贸易中，有时因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需时间更长，如小麦需8d，水稻需14d，某些蔬菜和牧草种子需2～3周，而多数林木种子则需要更长的时间。在这种情况下，可用生物化学速测法测定种子生活力作为参考。 种子生活力测定方法有10多种，根据其测定原理可大致分为4类：①生物化学法，如四唑测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。②组织化学法，如靛蓝染色法、红墨水染色法和软x射线造影法等。③荧光分析法。④离体胚测定法。本节主要介绍四唑测定法、离体胚测定法、染料染色法和软x射线造影法。 Z—2生活力测定方法 一、测定原理 ??? 有生活力的种子，其活细胞原生质膜具有选择透性，当种子浸入染料后，染料大分子不能进入活细胞内，所以胚部等活组织不能被染料染色，而死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力，故可被染料染色。 二、测定方法 ??? （一）染色法 1．靛蓝染色法 ??? 此法适用于豆类、谷类、棉花、瓜类和林木等大粒种子的生活力测定。所用试剂为靛蓝（或称靛蓝洋红），分子式为C18H8O2N2（SO5Na）2，系蓝色粉剂，能缓慢溶于水。测定方法如下： ??? (l) 种子预处理：将种子浸人30℃水中，水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等种子须先去壳再浸种，浸种时间因种子不同而异，小麦、大麦、大豆、豌豆和向日葵等为3h，燕麦、芝麻等4h，油菜、花生、棉籽等6 h，蓖麻、红麻、大麻等7 h、黍8 h、水稻12 h、玉米20 h将充分吸胀的种子(100粒2次重复），沿胚中线纵切（如禾谷类）或剥去种皮（如双子叶种子），以备染色用。 ??? (2) 靛蓝染色：将处理好的种子置于培养皿或小烧杯内，加入靛蓝溶液淹没种子，纵切种子，用0.1％溶液，剥去种皮种子用0.2％溶液。染色时间禾谷类为15min，油菜、芝麻、红麻和大麻等30 min，大豆、亚麻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等60 min 豌豆180 min ?? （3）观察鉴定：取出染色后的种子，用清水冲洗后立即进行观察鉴定。凡种胚不染色或染成浅蓝色的、胚根尖端或少部分子叶染色的，为有生活力种子；凡种胚全部染成蓝色的，或胚根、胚轴、胚芽、子叶等大部分染成蓝色的，为无生活力种子。 2.红墨水染色法 ??? 其测定原理、种子预处理方法以及染色时间等与靛蓝染色法基本相同，只是所染成的颜色不同，死胚染成红色，活种子胚不染色。测定时用刚开瓶的红墨水，加水稀释后使用，红墨水与水的比例：小麦、玉米、大豆和棉花等为1：60，大麦以1：120为宜。到达规定染色时间后取出种子，用清水冲洗并立即观察鉴定。 （二）其 他 方 法 四唑测定法 ??? （一）四唑测定法概述 ??? 1．发展简史 ??? 四唑测定法于1942年由德国H.Lakon教授发明，二战期间传入美国。IST A于1950年成立四唑测定技术委员会，1953年首次将四唑测定列入国际种子检验规程。1974年，ISTA 四唑测定技术委员会主席美国R.P.Moor教授，为发展和推进四唑测定技术的标准化，主持编写《四唑测定手册》，其后经过多次ISTA会议讨论修改，于I984年正式公布发行。该手册汇集了世界上最先进实用的种子四唑测定技术，以及650多个属和种的农作物、蔬菜、林木、牧草、药材和花卉种子的具体测定技术，堪称最具权威性的四唑测定参考。种子生活力四唑测定技术经过不断研究和完善，目前已在全世界广泛应用。 ??? 2．特点 ??? 四唑测定具有原理可靠、简便快速、结果准确、不受休眠限制以及成本低廉等特点。该法比按细胞膜选择透比不同的染色方法更为可靠，所击仪器设备和物品较少，程序比较简单，一般2 4 h之内即能获得测定结果，不论是休眠种子还是非休眠种子均适用。因此，该法是世界公认的最有效的种子生活力测定方法。 ??? 3．适用范围 ??? 根据国际种子检验规程规定，四唑测定适用于下列范围： ??? (1）测定休眠种子、收获后需马上播种的种子以及发芽缓慢的种子的发芽潜力。 ?? （2）测定发芽试验末期末发芽种子的生活力，特别是怀疑有休眠时。 ??? (3)? 测定种