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苦参杀蚊虫活性研究.doc
苦参杀蚊虫活性研究
摘 要:以苦参、苦楝、曼陀罗和白头翁为原料,研究了苦参及其组方不同提取物对按蚊幼虫和成虫的毒杀作用,发现苦参组方的乙醇提取物对成蚊的毒杀作用较好,本实验对应研发绿色家居杀虫剂具有一定的价值前景。
关键词:苦参;蚊虫;孑孓;活性
苦参(Sophora ftavescens Afit.)为豆科槐属植物。多生在山坡、沙地、草坡、灌木林中及田野附近,全国各地均有分布。苦参作为医药使用,据文字记载已有二千多年的历史。药理实验表明,苦参对痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌和乙型链球菌有明显抑制作用[1];苦参能抑制或杀灭蓝氏贾第鞭毛虫和阿米巴原虫,在体外其醇浸膏有抗滴虫作用[2]。苦参碱在治疗慢性肝炎和肝纤维化等方面已得到广泛的应用。
为进一步开发利用苦参植物资源,研制开发新型植物源性杀蚊虫药品,本研究以蚊虫为试验对象,对苦参及其组方的不同溶剂提取物杀蚊虫活性[3,4]进行测定,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
试验选择蚊虫幼虫孑孓和成虫为研究对象,试验材料为苦参根、苦楝、白头翁和曼陀罗:中药材采购与亳州中药材交易市场,经亳州职业技术学院刘耀武副教授鉴定,60℃烘干,粉碎过30目筛,低温条件下保存备用。
1.2 试验方法
(1)药材提取。称取上述苦参两份,每份10 g,分别用100 mL 蒸馏水和100 mL乙醇室温提取24 h,除去药渣得上清液,备用;苦楝、白头翁和曼陀罗各10 g,分别用100 mL 蒸馏水和100 mL乙醇室温提取24 h,除去药渣得上清液,备用。
(2)供试蚊虫。选取按蚊幼虫孑孓(2日龄,体长2-3 mm)21组,每组10只放置于20 mL培养液中备用;选取按蚊成虫10组,每组10只放置于封闭的三角烧瓶中,备用。
(3)室内毒力测定。每种供试提取物设4~5 个剂量,每次处理按蚊成、幼虫各10 只,4 次重复,试验均以对应浓度的乙醇溶液为对照。以孑孓在施药后的死亡时间为参数,测定提取物对按蚊幼虫孑孓的毒力;以按蚊成虫在不同浓度乙醇提取夜中的游泳时间为参数,测定提取物对按蚊成虫的毒力。
(4)结果计算。总死亡时间表示在试验过程中实验组试按蚊的死亡情况,它反映了含苦参样品对按蚊总的毒杀情况,但它不能排除试验过程中的误差,即在试验过程中由于其他因素引起按蚊的死亡情况,采用校正死亡时间表示的试验结果可以排除由于其它因素造成的试验误差,校正死亡时间按下公式计算。
校正死亡时间 = 实验组死亡时间/(1-1/对照组死亡时间)
2 结果与分析
2.1 苦参毒杀孑孓效果测定结果
取4组含10只孑孓的20 mL培养液,分别加入苦参水提物2 mL、4 mL、10 mL和20 mL,第五组用滤网取10只孑孓放置于20 mL水提物中。观察孑孓在含苦参提取物中的游泳时间,以每组孑孓死亡5只(死亡率=50%)的时间为参数记为死亡时间,时间单位为分钟,以孑孓在水中的生存时间为空白组,空白组死亡时间为无限大。由此看出,苦参水提物对孑孓具有较强的毒杀活性,且水提物浓度越大,其对孑孓的毒杀作用越强,在未经稀释的水提物中孑孓死亡时间为5.0 min,苦参水提物对孑孓的毒力如下。
第一组:体积比浓度10:1 10只 死亡时间41分钟 校正死亡时间41分钟
第二组:体积比浓度5:1 10只 死亡时间34分钟 校正死亡时间34分钟
第三组:体积比浓度2:1 10只 死亡时间28分钟 校正死亡时间28分钟
第四组:体积比浓度1:1 10只 死亡时间9分钟 校正死亡时间9分钟
第五组:体积比浓度0:1 10只 死亡时间5分钟 校正死亡时间5分钟
试验组取4组含10只孑孓的20mL培养液,分别加入苦参乙醇提物2mL、4mL、10mL和20mL,第五组用滤网取10只孑孓放置于20mL水提物中。观察孑孓在含苦参提取物中的游泳时间,以孑孓死亡50%的时间为参数记为死亡时间,时间单位为分钟;对照组分别以对应浓度的乙醇溶液做空白试验,观察孑孓的死亡时间。不同浓度的乙醇对孑孓有一定的毒杀作用,不同浓度苦参乙醇提取物对孑孓的毒杀作用强于相应的苦参水提物对孑孓的毒杀作用,在未经稀释的乙醇提取物中孑孓死亡时间为3.0 min。
2.2 苦参组方毒杀孑孓效果测定结果
试验组取4组含10只孑孓的20 mL培养液,分别加入苦楝乙醇提物2mL、4mL、10mL和20mL,第五组用滤网取10只孑孓放置于20mL水提物中。观察孑孓在含苦楝提取物中的游泳时间,以孑孓死亡50%的时间为参数记为死亡时间,时间单位为分钟;对照组分别以对应浓度的乙醇做空白试验,观察孑孓的死亡时间。
取苦参、苦楝、曼陀罗和白头翁
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