冻干基因工程α2a干扰素制造及检定规程.docxVIP

冻干基因工程α2a干扰素制造及检定规程本品系用带有人α2a型干扰素基因重组质粒的大肠杆菌，经发酵培养及单克隆抗体亲和层析后精制而成。用于治疗某些病毒性疾病及部分肿瘤疾病。1　菌种1.1菌种来源基因工程α2a干扰素工程菌由带有人α2a干扰素基因的重组质粒转化大肠杆菌而来。投产的工程菌需经卫生部批准。1.2菌种特性菌种表达稳定，表达水平符合投产菌种要求。1.3制造用菌种库的建立从原始菌种库传出，经扩大后冻干保存，或由上一代制造用菌种库传出，扩大后冻干保存作为制造用菌种库，但每次只限传三代。每批制造用菌种库均进行下列检定，合格后方可投产。1.3.1划种LB琼脂平板应呈典型大肠杆菌集落形态，无其他杂菌生长。1.3.2涂片革兰氏染色在光学显微镜下观察，应为典型的革兰氏阴性杆菌。1.3.3对抗生素的抗性应与原始菌株相符。1.3.4电镜检查应为典型大肠杆菌形态，并证明无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。1.3.5生化反应应符合大肠杆菌生物学性状。1.3.6干扰素的表达量在摇床培养，应符合原始菌种的表达量。1.3.7质粒检查应做该质粒的酶切图谱，并应与原始质粒相符。1.3.8表达的干扰素型别应用标准抗α干扰素血清做中和试验，证明型别正确。1.4生产菌种从制造用菌种库传出供生产用的菌种，称为生产菌种。1.4.1生产菌种的制备及检定取制造用菌种库冻干菌种开启后划种LB平板2～3块，培养后挑取平板中5