【2017年整理】抗血清制备及抗体效价检测.docxVIP

短期免疫抗血清制备及抗体效价检测黄健，应技1201,2012304200315摘要 通过一定程序注射颗粒性抗原或可溶性抗原免疫小鼠和家兔，是实验室制备多克隆抗血清的常用方法。虽然依据常规免疫方案可以制备出效价高、亲和力强的抗血清，但整个常规方案耗时近１个多月，也容易受到免疫动物健康状况的影响和饲养成本的限制。本试验以牛血清白蛋白为抗原缩短免疫注射周期，对小鼠和家兔进行短程快速免疫。并进行效价检测，以探讨短程快速免疫方案的实效性。关键词 免疫，抗血清，抗原，ELISA主线实验分为三个小实验分别为：实验一：免疫小鼠（每组一只），家兔（每班一只）。实验二：对免疫后的小鼠和家兔进行抽血、放血，其中老鼠采用断尾取血家兔采用颈动脉放血，分离抗血清 。实验三：ELISA测定抗体效价。另有一个穿插实验：血型鉴定。1 实验一：免疫用具有抗原性的物质注入到健康动物的机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。为了制备高效价的抗血清，我们需要考虑下列五个因素。实验动物的免疫反应性，抗原的免疫原性，抗原的剂量，免疫途径，免疫时间间隔。1.1实验动物的选择常用的免疫动物有家兔、羊、马、大鼠、小鼠、豚鼠等。免疫用动物应选适龄、健壮，最好为雄性。家兔一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖