蛙的坐骨神經—腓肠肌的标本制作及神经干的性质实验.docxVIP

中央民族大学生命与环境科学学院 实验报告生理学实验报告蛙的坐骨神经—腓肠肌的标本制作及神经干的性质实验姓名：唐胜华 学号：0941063学院：生环学院 班级：09生科指导老师：覃筱燕 完成时间：2011.10.17组别：十一、十二组 成员：韩旭思 关晴月 唐胜华一、实验目的1、学习蛙类动物单毁髓和双挥髓的处死办法。2、学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本以及腓肠肌标本制备的方法。3、学习电刺激方法及肌肉收缩的记录方法。4、观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。5、观察肌肉收缩的总和以及强直收缩现象。6、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的原理。7学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。二、实验原理腓肠肌由许多的纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应，。当刺激强度过小时，不应期肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。而能引起肌肉发生收缩的最小刺激强度，为域刺激，但全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。这时，即使再加大刺激强度，肌肉的收缩强度也不会随之而增大。可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激。肌肉组织对于一个域上强度的刺激，发生一次迅速地收缩反应，即单收缩。单收缩的过程分为三个时期，潜伏期、收缩期、舒张期。两个同等强度的域上刺激，相继作用与神经-腓肠肌标本，如果刺激间隔大于单个收缩的时程，肌肉则出现两个单独的单收缩；如果刺激间隔小于单收缩的过程而大于不应期，则出现两个收缩反应的重叠，及收缩的总和。 如果第二次刺激在第一个收缩反映的不应期内，则第二次刺激不产生收缩反应。但同等强度的连续域上刺激作用于标本时，则出现多个反应的叠加，及强直收缩。但第一手所发生在第一收缩的舒张期，即发生不完全强直收；后一收缩发生在第一次收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，即发生完全的强直收缩。神经干在收到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋冲动，可以记录出双向动作电位，假如在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相动作电位。神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下市随刺激强度的增加而增大的。如果在原理刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。即可按照公式v=m/s来计算出兴奋的传导速度。蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为3-29μm，其中直径最粗的有髓纤维为Aα类纤维，它是蛙神经的主要组成部分，传导速度在正常室温下为35-40m/s。当神经干在屏蔽盒内一端收到刺激时，表现为负电位变化的动作电位由刺激点开始从前向后传导。设前端通道电极为b,后端通道电极为c,当动作电位传到b电极部位时，b、c之间出现电位差，c为正，b为负，扫描线向上偏移。当动作电位继续传导至b、c两电极下或两电极之间时，b、c又处于等电位状态，扫描线回到基线。当动作电位进一步推到c电极部位时，b、c之间又出现电位差，b为正，c为负，与电位达到b电极时相反，扫描线向下偏移。其后，记录又回到零位。这样获得的记录就为双相动作电位。 图1、神经干上复合电位传导的特征为了验证神经在膜上是以局部电流的方式传导兴奋，我们可以设置验证试验。在b、 c之间滴加普鲁卡因时，由于普鲁卡因对神经具有麻醉作用，神经的兴奋被阻断，此时b位于无损伤部位，而c则被阻断。在进行刺激前就可以记录到b为正，c为负的损伤电位。当在神经干一端进行刺激时，b级的电位变化实际上是由于负电位抵消了损伤电位所致。当动作电位传导到c极时，由于c极部分已丧失了兴奋性，不会再引起电位变化，因此，整个记录呈现出单相动作电位。 图2、阻断剂阻断神经兴奋传导实验三、实验步骤1、蟾蜍神经-腓肠肌标本的制作参考：解景田，刘燕强，崔庚寅. 《生理学实验》第三版，高等教育出版社,2009.1:36-392、刺激强度和频率与肌肉收缩的关系：解景田，刘燕强，崔庚寅. 《生理学实验》第三版，高等教育出版社,2009.1:40-413、神经干动作电位传导速度的测定：解景田，刘燕强，崔庚寅. 《生理学实验》第三版，高等教育出版社,2009.1：43-46 注：试验中相关操作对照图片四、‘实验结果1、刺激强度与肌肉收缩的关系。 图3、刺激强度与肌肉的收缩关系实验图片中，在低于0.060V的电压刺激时，肌肉不发生收缩，说明在较低的电位刺激时，并不能引起神经细胞膜表面的NA+和K++的电压门控开放，神经细胞内的K+和细胞外面的NA+无法通过通道流出或进入细胞内，这就使得神经细胞无法形成局部电流