貴州大学基因工程复习题.docVIP

名词解释λ噬菌体的cos位点（左右两端各12核苷酸组成的5’-粘性末端，两者核苷酸序列互补，在λDNA包装前是线状的）插入质粒构成的克隆载体，用来克隆长度超过40kb的DNA片段。 DNA Polymerase（DNA聚合酶）：以DNA或RNA为模板，合成DNA的酶。 DNA Sequencing（DNA测序）：检测一个DNA分子的核苷酸序列。 Gene Cloning（基因克隆）：把一段携带某个基因的DNA片段插入载体，进而使宿主细胞不断产生重组DNA分子。此外，也包括那些不使用载体而实现相同结果的实验技术（如直接转化法）。 Genomic Library（基因组文库）：大量克隆的集合，包含了某个生物体的所有基因。 GM Crop（基因改良作物）：使用基因添加或基因敲除的方法处理过的作物。 Homologous Recombination（同源重组）：两个同源双链DNA之间的重组，也就是核苷酸序列相似性很高的DNA分子之间的重组。 Insertional Inactivation（插入失活）：一种克隆方法，通过在载体上插入一段新的DNA，使得载体本来携带的基因失活。 DNA Ligase（DNA连接酶）：在细胞内，修复双链DNA分子中断裂的单链。纯的DNA连接酶被用来在基因克隆中连接DNA分子。 Multiplex PCR（多重PCR）：同一个PCR反应体系里加入两对以上的引物，同时扩增出所研究的DNA分子中的两个或两个以上的核苷酸片段的 PCR反应。 Phagemid（噬菌粒）：一种双链质粒载体，具有来自单链丝状噬菌体的复制起点，因此可用来合成单链的克隆基因。 Physical Map（物理图谱）：通过直接观察DNA分子获得的基因图谱。 Primer（引物）：一条短的寡核苷酸单链，能够通过碱基配对结合在单链模版分子上，作为DNA聚合酶指导下的互补链合成的起点。 Recombinant（重组体）：包含一条重组DNA的转化细胞。 Reporter Gene（报告基因）：一个表型能够在转化生物体中被检测出来的基因，经常用作调节区的删除分析。 Restriction Endonuclease（限制性内切酶）：只能够在一定数量的专一性核苷酸序列处识别和切割DNA分子的内切酶。 RFLP Linkage Analysis（RFLP联接分析法）：使用紧密连接的RFLP作为DNA样品中特定等位基因存在的标记的分析方法，通常用于筛选因某个基因缺陷引起的遗传病个体。 Shotgun Approach（鸟枪法）：一种基因组测序方法，是将要测序的分子随机切成多个片段分别进行测序的方法。 Vector（载体）：一个能够在宿主生物体内进行复制的DNA分子，期间能够插入基因以构成重组DNA分子。 Ti Plasmid（Ti质粒）：在根瘤农杆菌细胞中发现的大型质粒分子，能够在特殊种类的细胞中引发冠瘿的形成。 Yeast Artificial Chromosome（酵母人工染色体）：包含酵母染色体结构成分且能够克隆非常大片段的DNA的克隆载体。 选择【10*2分】 判断【5*2分】 问答题【3*8+1*16分】 一、What are the basic steps in genetic engineering ? （基因工程的基本步骤是什么？） 二、How is PCR used in genetic engineering?（ 应用：①核酸基础研究②序列分析③检测基因表达④从cDNA文库中放大特定序列⑤研究已知片段邻近基因或未知DNA片段⑥转基因检测 三、What is the principle of RAPD?（RAPD的基本原理是什么？） 四、Discuss safety of transgenic engineering？（讨论一下转基因的安全性问题）Which tool enzymes are used in genetic engineering? Briefly describe their main functions.（基因工程的工具酶有哪些？简要描述他们的）’隐蔽末端；催化合成cDNA第二链；DNA序列测定； 3.3 Taq DNA聚合酶：聚合酶链式反应（PCR）； 3.4 逆转录酶：合成cDNA；对有5’突出末端的DNA片段作末端标记（补平反应）；双脱氧法测序；制作探针； 4. 修饰酶：去除或添加化学基团的酶。 4.1 碱性磷酸酶：去除DNA分子5’末端磷酸基团； 4.2 多核苷酸激酶：多核苷酸5’-OH磷酸化，制末端标记探针； 4.3 末端转移酶：使3’-末端加同聚物尾；标记