GrMYC2基因克隆和序列4-26探索.docVIP

编号： xx 级 xxxxx 号 X x师 范 学 院 本科生毕业论文 题 目 滇龙胆GrMYC2基因的克隆与序列分析 资源环境学院 专 业 生物 指导教师 x x x 姓 名 x x x 学 号 xxxxxxxx 2014年 4月 20日 目录摘要 2 关键词 2 1 引言 2 2 材料与方法 3 2.1 材料与试剂 3 2.2 GrMYC基因的PCR扩增 3 2.3 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 4 2.4 GrMYC2基因片段的切胶回收 4 2.5 GrMYC2基因与T载体的连接 4 2.6 pMD19-GrMYC2质粒转化大肠杆菌感受态细胞 5 2.7 挑菌及质粒提取 5 2.8 酶切检测 6 2.9 测序与序列分析 6 3 结果与分析 7 3.1 滇龙胆叶片GrMYC2基因的扩增 7 3.2 GrMYC2基因的胶回收 7 3.3 pMD19-GrMYC2质粒提取与检测 7 3.4 pMD19-GrMYC2质粒的酶切检测 8 3.5 测序结果分析 8 3.6 GrMYC2基因的生物信息学分析 10 4 讨论 12 5 参考文献 12 致谢 14  滇龙胆GrMYC2基因的克隆与序列分析 （云南师范学院资源环境学院系）指导教师： 摘要：在拟南芥和长春花中，茉莉酸甲酯通过MYC2蛋白调控萜类的合成。药用植物滇龙胆中的MYC2蛋白还未见报道。以滇龙胆幼叶cDNA为模板，采用PCR技术成功扩增到GrMYC2基因，胶回收后，进行TA克隆，酶切检测正确后，进行DNA测序。序列拼接后，进行生物信息学分析。本研究将为滇龙胆GrMYC2基因功能研究奠定基础。 关键词：滇龙胆；GrMYC2；基因克隆；序列分析 Cloning and sequence analysis of GrMYC2 gene in Gentiana rigescens Chenmical education Pi Chenkui 2010021243 (College of Resources and Environment, Yuxi Normal University, Yuxi 653100) Instructor: Li Caixia Abstract: The synthesis of terpenoids are regulated by methyl jasmonate via MYC2 protein in Arabidopsis thaliana and Catharanthus roseus. The MYC2 protein of Medicinal plants Gentiana rigescens has not been reported. A GrMYC2 gene was amplified by PCR using the cDNA template of young leaves. TA cloning was performed after recycling, and the gene was sequenced after the digestion test by restriction enzymes. Bioinformatics analysis of GrMYC2 gene was done after splicing. This study will lay a foundation for the research of gene function of GrMYC2 in Gentiana rigescens. Key words: Gentiana rigescens; GrMYC2 gene; Gene cloning; Sequence analysis  1 引言 滇龙胆(Gentiana rigescens)为龙胆科（Gentianaceae）龙胆属(Getinana L.)多年生草本植物，别名坚龙胆、苦胆、炮仗花、兰花根、青鱼胆等。主要分布于中国大陆的四川、贵州、湖南、广西等地，是中国的特有植物，也是云南药材。滇龙胆是提取龙胆苦苷的主要野生药用原料之一，有很高的药用价值，具有清热解毒，消炎降压、保肝、健胃、利胆等功效。野生的滇龙胆自然生长能力较低，加上人们过度挖采，该物种以陷入濒危境地。研究发现植物激素茉莉酸及其衍生物甲基茉莉酸是植物在生物或非生