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Agilent 1200 LC （中文版 B01.01） 现场培训教材 安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部 一、 培训目的： ● 基本了解1200LC硬件操作。 ● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。 二、 培训准备： 1、仪器设备： Agilent 1200LC ● G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。 ● G1313A（标准型自动进样器）。 ● G1316A（柱温箱）。 ● G1314A（VWD检测器）。 ● G1362A（示差检测器）。 ● 色谱柱: Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column P/N 993967-902 2、溶剂准备： ● 色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。 ● 二次蒸馏水 基本操作步骤: (一)、开机： 1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。 2、打开 1200 LC 各模块电源。 3、待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与1200LC 通讯，进入的工作站画面如下所示。 4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“显示顶部工具栏”，“ 显示状态工具栏”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开冲洗阀。 7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。 8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。 9、点击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定” ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。 10、点击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵， 关闭冲洗阀。 11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：1.0ml/min。 12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积，点击“确定”。 （二）数据采集方法编辑： 1、开始编辑完整方法： ● 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项，如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。 2、方法信息： ● 在“方法注释”中加入方法的信息（如：测试方法）。 ● 点击 “确定”， 进入下一画面。 3、泵参数设定：（以四元泵为例） ● 在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入 ”一行“时间表” ,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 ● 点击“确定”，进入下一画面。 4、自动进样器参数设定:（以标准G1313为例） ● 选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 5.0ul ,洗瓶位置为6号。“标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“使用进样器程序”---可以点击“编辑” 按钮进行进样程序编辑。 ● 点击进“确定”，进入下一画面。 5、柱温箱参数设定: ● 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。并选中它,点击“更多” 键,如图所示,选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。 ● 点击“确定”，进入下一画面。 6、VWD检测器参数设定: ● 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如0.1min (2s)。 ● 在“时间表” 中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。点击“确定”，进入下一画面。 7、 RID检测器参数设定: ● 色谱条件: 进样体积: 20ul 。 光学单元温度: “关闭” 。 极性: “正极性” 。 峰宽(响应时间) : 4s 。 ● 如图所示: “光学部件温度”---若环境温度控制在±2℃,设定为“关闭”, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“峰宽 (响应时间)”---大多数分析设为“ 4s” ，只有在高速分析下设为更短。“分析后自动循环”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。 ● ***** 点击RID图标，选择RID Control ：Heater 设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为ON。手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。 8、 在“ 运行时选项表 ”中选