人参皂苷的提取、分离与结构鉴别.ppt.pptVIP

天然产物化学实验 药物化学教研室 实验主要内容 实验一、硅胶薄层色谱板的制备和硅胶色谱柱的填装(1) 实验二、芦丁的提取、分离与鉴别(2,3) 实验三、冬凌草甲素的提取、分离与结构鉴别(4,5) 实验四、人参皂苷的提取、分离与结构鉴别(6,7) 实验四 人参皂苷的提取、分离与结构鉴别 实验简介 五加科植物人参，多年生草本植物，喜阴凉、湿润的气候，多生长于昼夜温差小的海拔500～1100米山地缓坡或斜坡地的针阔混交林或杂木林中。由于根部肥大，形若纺锤，常有分叉，全貌颇似人的头、手、足和四肢，故而称为人参。生长千年的人参，极为罕见，药用价值极高。 主治：用于气短喘促，心悸健忘，口渴多汗，食少无力，一切急慢性疾病及失血后引起的休克、虚脱。大补元气，固脱生津，安神。 实验简介 人参皂苷是人参中的活性成分，都含有由30个碳原子排列成四环三萜类成分。它们依苷元的不同而被分为两组：达玛烷型和齐墩果烷型。 达玛烷类型包括两类：原人参二醇和原人参三醇，这两种皂苷元均不稳定，水解过程中会转变成人参二醇和人参三醇。目前已有80余种皂苷从人参中被鉴别，其中Rb1和Rg1分别为二醇和三醇系列的主要成分。 另外，在人参总皂苷中还分离得到了几种齐墩果烷型皂苷，人参总皂苷含量为1.5-2.0%. 一、实验目的 1、学习人参皂苷的提取纯化与鉴定方法。 2、掌握D101大孔吸附树脂柱的应用。 二、实验原理 人参皂苷是极性成分，能用醇性溶剂提取及通过D101大孔吸附树脂纯化。 三、实验仪器与试剂： 电热套，圆底烧瓶500ml，回流冷凝管，旋转蒸发仪，烧杯，纱布，水泵，分液漏斗，层析柱，TLC板； 人参切片，95%乙醇，石油醚（60~90oC），氯仿，甲醇，Rb1和Rg1的标准品，大孔吸附树脂，蒸馏水等 四、实验步骤 1、提取 取人参粉末100g，置500ml圆底烧瓶中，加250ml 95%乙醇回流提取1h，过滤，再加250ml乙醇回流提取40min，合并两次提取液。 减压回收得浸膏，将浸膏混悬于水中（15-20mL），用石油醚脱脂萃取2次（20ml*2），留水相，备用。 四、实验步骤 2、纯化 脱脂后的混悬液加少量乙醇使其溶解，慢慢加入处理好的大孔吸附树脂柱上，吸附完全后，分别用水 300ml→30%乙醇 200ml→60%乙醇 300ml→95% 200 ml 乙醇进行梯度洗脱。 收集60%乙醇的洗脱液，减压回收得人参总皂苷。 3、TLC鉴定 薄层板：硅胶GF254 展开剂：氯仿－甲醇－水（6.5:3.5:1,下层） 显色剂：5%硫酸乙醇，加热。 样品：人参总皂苷 对照品：Rb-1，Rg-1 四、注意事项 1、D101大孔吸附树脂需预处理。 2、等60%乙醇将30%乙醇洗下才收集。 五、大孔吸附树脂 大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂，具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积，可以有选择地通过物理吸附水溶液中的有机物，是20世纪60年代发展起来的新型有机高聚物吸附剂，已在环保、食品、医药等领域得到了广泛的应用。 大孔吸附树脂一般为白色球状颗粒，粒度为20-60目。大孔吸附树脂的宏观小球系由许多彼此间存在孔穴的微观小球组成。 大孔吸附树脂是以苯乙烯和丙酸酯为单体，加入乙烯苯为交联剂，甲苯、二甲苯为致孔剂，它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。树脂一般为白色的球状颗粒，是一类含离子交换集团的交联聚合物，它的理化性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂，不受无机盐类及强离子低分子化合物的影响。 五、大孔吸附树脂 吸附机理 大孔树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作，使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。 大孔吸附树脂为吸附性和筛选性原理相结合的分离材料。大孔吸附树脂的吸附实质为一种物体高度分散或表面分子受作用力不均等而产生的表面吸附现象，这种吸附性能是由于范德华引力或生成氢键的结果;同时由于大孔吸附树脂的多孔性结构使其对分子大小不同的物质具有筛选作用。 通过上述这种吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离的目的。 大孔吸附树脂预处理方法 乙醇浸泡24h→用乙醇洗至流出液与水1：5不浑浊→用水洗至无醇味→5%HCl通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性→2%NaOH通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性，备用