離子色谱法-抑制型电导检测药物中的伊班膦酸钠.docVIP

离子色谱法-抑制型电导检测药物中的伊班膦酸钠及杂质的含量 曾雪灵，廉玫 戴安中国有限公司杭州实验室，浙江 杭州 310028 摘要：本文采用离子色谱抑制型电导快速测定药物中的伊班膦酸钠及其杂质的含量。采用Ionpac AG11-HC+ AS11-HC阴离子分析柱分离，以电导为检测器。用去离子水提取药物中的伊班磷酸钠及杂质离子，过0.45μm的过滤膜后直接进样。实验结果表明，在一定的色谱条件下，伊班膦酸钠及其杂质离子具体很好的线性，和重现性，及较低的检出限。最低检出量0.2mg/l。样品的平均加标回收率为98-105%。 关键词：离子色谱；药物；伊班磷酸钠 引言 磷是生物体内非常重要的元素，参与多种重要的生物和环境的转换过程。20 世纪80 年 代以来，人们研究开发了有机膦骨吸收抑制剂双膦酸盐（Bisphosphonates,BPs）类药物，并 成功地用于骨钙代谢疾病和一些骨相关疾病的治疗[1]。伊班膦酸钠（ibandronate monosodium，IB）属于第三代双膦酸类药物，具有高效、低毒和使用方便等优点，是不可 多得的双膦酸盐药物。2003年1O月和2004年2月，欧盟分别批准了伊班膦酸钠预防和治疗骨转移的适应证[2]。动物实验表明，IB抗骨质吸收的强度分别是依替膦酸钠(etidronate)、氯屈膦酸钠(clodronate)和帕米膦酸钠(pamidronate)的50000、5000和500倍[3]。 伊班膦酸钠及杂质的结构既缺少发色基团，又不具备电化学特性，故不能用常规的紫外、 荧光或者电化学分析方法检测。较早的文献报道[4]某些类似的二膦酸盐采用流动进样技术， 钼试剂柱后衍生，但是需要特殊的反应器，并且要加热到140℃，反应较为复杂。近年来国 内也展开相关研究的研究，赫立恩等用荧光淬灭法测定伊班膦酸钠注射液的含量。以桑色素 一钍为荧光剂，伊班膦酸钠为荧光淬灭剂，在408nm激发波长，504nm发射波长下测定荧光强度[5]。周杏琴等运行缓冲液为NaH2PO4，CTAB，加入对氨基苯磺酸作间接试剂。采用毛细管区带电泳，在缓冲液中加入淌度与其相接近的检测试剂，利用间接紫外检测法，测定伊班膦酸钠的含量[6]。/ 在本文中采用离子色谱法-抑制型电导检测可快速，灵敏地检测药物中的伊班膦酸根及 其合成过程中所引入的杂质离子。 1．实验部分 1.1 仪器 Dionex ICS 2000 离子色谱仪（美国Dionex公司）；EG50淋洗液发生器；DS6电导检 测器；Dionex ASRS300自再生抑制器；Chromeleon 6.8色谱工作站。 1.2 试剂 所有试剂均为分析纯。伊班磷酸钠（ibandronate sodium, IB）均由杭州普惠科技有限公司提供。标准溶液均由1000mg/L的贮备液（置于4℃冰箱中）稀释配制，溶液均用18.2MΩ.cm的二次去离子水配制。/Shop/Shop.asp?ID=15661 1.3 色谱条件 IonPac AG11-HC保护柱（250mm×4mm）；IonPac AS11-HC分离柱（250mm×4mm）； 25μL进样量；柱温30℃；流速：0.8ml/min。 1.4 样品前处理 0.05g样品定容至100mL，再取0.20mL定容到25mL后进样。 2．结果与讨论 2.1方法的线性范围、精密度和最低检测限 在所选的色谱条件下，各种待测离子分离度远大于1.50，能够很好地保证定量和定性。 考察方法的稳定性是通过测定连续10针同一样品的各指数的相对标准偏差RSD。F，Cl, PO32, PO43, IB的峰保留时间的RSD分别为1.26％、0.98%, 1.01%，1.32%，1.23%；峰面积的RSD值分别为2.33％，2.56％，2.24%, 1.98%，3.21%；峰高的RSD分别为2.82％，3.21％，2.96％, 2.45%, 3.87%。 2.2 样品测定和回收率测定 使用前面所说的色谱条件对真实样品中的F-，Cl-，PO32，PO43-和IB进行测定。通过对比样品色谱图与标准溶液的保留时间进行定性。在样品的处理方面，0.05g样品定容至 100mL，再取0.20mL定容到25mL后进样。得到的样品色谱如图2所示。 加标回收率也是这个实验考察的对象之一，5种离子的加标回收率在98％到105％之间 （表3），符合分析测试的要求。 3 结论 本文提出的方法以离子色谱抑制电导法测定药物中的伊班膦酸离子及其杂质离子，灵 敏度高，方法简便，分离时间短，可广泛应用于生产过程中的产品质量控制及市场商品检验。 参考文献