动物基因工程[精选].pptVIP

* * 第九章 动物基因工程 一 、 动物基因工程的概念与发展 动物基因工程，即利用基因工程技术来人为地改造动物的遗传特性的技术体系。 它的具体应用就是生产转基因动物，即用基因工程的方法获得目的基因并导入到动物的受精卵中，使外源基因与动物本身的基因组DNA整合到一起，并随细胞的分裂而增殖，从而在动物体内得到表达，产生具有特定性状的个体。 在这里，被转入并整合到动物基因组中的外源基因称为转入基因，携带了外源基因并能将此稳定遗传给后代的动物叫转基因动物。 ? Palmiter(1982)等利用该技术获得了整合外源生长激素基因的首批转基因小鼠。此后相继培育成功了转基因兔、绵羊、猪、鱼、昆虫、牛、鸡、山羊、大鼠等转基因动物。 自1982年转基因鼠问世以来，转基因动物研究在许多领域都取得了令人瞩目的成就。 一般来讲，根据不同的目的，动物基因工程可以简单地划分为四种类型： （l）疾病型转基因动物； （2）利用转基因动物制药； （3）动物改良型； （4）基础生物学研究。 转基因动物在诸多领域具有广阔的应用前景：??? 1、转基因动物是对多种生命现象本质深入了解的工具，如研究基因结构与功能的关系，细胞核与细胞质的相互关系，胚胎发育调控以及肿瘤等；??? 2、可以用来建立多种疾病的动物模型，进而研究这些疾病的发病机理及治疗方法。目前已建立的疾病模型有：癌症、动脉粥样硬化、镰状细胞性贫血、囊状纤维化、红细胞增多症、肝炎、免疫缺陷、自发性高血压等。建立疾病模型可用于疾病发病机理的研究，对于人们认识疾病、预防和治疗疾病有着不可替代的作用。就某些器官来说，转基因动物器官用于人体移植将有重大价值。 比如，知道高血压症是由某种原因造成，可以生产一些高血压小鼠，让医生在小鼠身上试用各种疗法； 3、由于转基因动物技术可以改造动物的基因组，使家畜、家禽的经济性状改良更加有效，如使生长速度加快、瘦肉率提高，肉质改善，饲料利用率提高，抗病力增强等。对于动物遗传资源保护的意义更加深远，对挽救濒危物种是必不可少的； 4、转基因动物可作为医用或食用蛋白的生物反应器。 1987年，世界上第一只商业化转基因绵羊在英国著名的罗斯林研究所诞生。同时，“生物反应器”的概念也由此产生。 动物生物反应器是指将外源目的基因导入整合到动物基因组中,该外源基因可以遗传给后代,并能够表达相应目标蛋白,所获得的个体表达系统就是动物生物反应器.这样的一个具有动物生物反应器功能的转基因动物,其体内可以合成所需的蛋白,并通过乳汁、尿液、血液、精液、蛋清或蚕丝等分泌产生.  转基因动物多以乳腺、唾液腺和膀胱为靶位。在这些表达器官中，通过构建合适的载体，选择适当的启动子和调控序列可产生比正常水平高得多的重组蛋白。例如，用转基因动物乳腺作为生物反应器生产基因工程人类蛋白质药物有着其他方法不可比拟的优越性。乳腺生物反应器好比在动物身上建“药厂”。我们可以源源不断获得目的基因的产品。它的优越性还表现在产量高，易提纯，表达产物已经过充分的修饰和加工，具有稳定的生物活性。 以转基因动物来生产目的产品，可极大地降低成本和投资风险。有经济学家算过一笔帐，若用其它生产工艺来生产1克蛋白质，成本需800-5000美元，而利用转基因动物只需0.02-0.5美元。 应用转基因动物生产基因药物也是一种可以获得巨额经济利润的新型产业。例如荷兰GenPharm公司用转基因牛生产乳铁蛋白，预计每年从乳汁中提炼出来的营养奶粉的销售额是50亿美元。用转基因羊生产的含α-抗胰蛋白酶的羊奶每升可售6000美元。国外经济学家预测，大约10年后，转基因动物生产的药品就会鼎足于国际市场，单是药物的年销售额就将超过250亿美元。 目前已在下列动物的乳汁中生产出一些人类蛋白质药物： 牛：抗凝血酶、纤维蛋白原、人血清白蛋白、胶原蛋白、乳铁蛋白、糖基转移酶、蛋白C等； 山羊：抗凝血酶原、抗胰蛋白酶、血清白蛋白、组织纤溶原激活因子、单克隆抗体等； 绵羊：抗胰蛋白酶、凝血因子Ⅸ、蛋白C； 猪：凝血因子Ⅸ、蛋白C、纤维蛋白原、血红蛋白。 ? 5、生产玩赏动物，如同猫一样大的小马，如同鼠一样大的兔子，以及各种不同毛色和花纹的观赏动物。 二、动物转基因操作的一般程序 转基因动物的主要技术路线步骤包括：目的基因的分离与克隆、表达载体的构建、受体细胞的获得、基因导入、受体动物的选择及转基因胚胎的移植、转基因整合表达的检测、转基因动物的性能观测及转基因表达产物的分离与纯化、转基因动物的遗传性能研究以及性能选育、组建转基因动物新类群等。 生产转基因动物的目的不同所选择的目的基因也各异。根据不同的研究目标，选择目的基因的类型有如下几种。 1.编码或调控机体生长发育或特