检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质课件概述.ppt

一.实验原理： ①.还原性糖的鉴定： 还原性糖+ ②.脂肪的鉴定： 　　　 脂肪+ 脂肪+ 　　　 ③.蛋白质的鉴定： 蛋白质+ ④淀粉 + 斐林试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ 橘黄色 苏丹Ⅳ 红色 双缩脲试剂 紫色 碘 蓝色 （葡萄糖、果糖、麦芽糖） 水浴 加热 二.试剂： 斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液） 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 双缩脲试剂（A液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，B液：质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液） 体积分数为50%的酒精溶液 碘液、蒸馏水 结论：苹果组织样液中含有还原糖。 2mL苹果组织样液 1mL刚配制好的斐林试剂 50-65度温水水浴加热约2分钟 1、还原糖的检测和观察： 三.方法步骤: 甲液和乙液等量混合均匀 ①还原糖有 。 ②试剂： . （甲液：0.1g/ml 的 , 乙液：0.05g/ml的 .） 甲乙液必须 后再加入样 液中， 。 ③必须 。 葡萄糖，果糖，麦芽糖 用水浴加热 斐林试剂 NaOH CuSO4 等量混合均匀 现配现用 注意事项： ④颜色变化： 浅蓝色 棕色 砖红色 ⑤ 取材时应注意选择颜色较浅、含糖量高的生物组织，如苹果、梨 2、脂肪的检测和观察： 圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 方法一：待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色 取材： 花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片 方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察 子叶细胞的着色情况。 制片 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min） ③去浮色（用50﹪酒精） ④ 制成临时装片 观察 低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察 结论： 注意事项： ①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。 ②酒精的作用是： 。 ③需使用显微镜观察 洗去浮色 3、蛋白质的检测和观察： 黄豆浆滤液或蛋清稀释液 制备组织样液 组织样液2mL 双缩脲试剂A液1mL 双缩脲试剂B液4滴 说明组织样液中存在蛋白质。 （3）注意事项： 试剂： （A液：0.1g/ml的 ； B液： 0.01g/ml的 ） 先加 ，再加 。 。 双缩脲试剂 A液1ml B液4滴 NaOH CuSO4 蛋白质的检测结果 斐林试剂与双缩脲试剂的比较： A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4 甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 紫色物质生成 砖红色沉淀 先加A液，再加B液，不需加热 甲液与乙液先在另一试管内等量混匀，且现配现用，需加热 蛋白质 还原性糖 试剂组成 检验结果 试剂用法 检测对象 双缩脲试剂 斐林试剂 4、淀粉的检测和观察： 马铃薯匀浆组织样液2mL 碘液2滴 结论： 说明组织样液中存在淀粉。 摇匀后变成蓝色 1.在下列四支试管中分别加入一些物质，甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是( ) A.甲、丁 B.甲、乙、丁 C.甲、乙、丙 D.甲、丙 对应训练 D 2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是Ａ．用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定Ｂ.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液Ｄ．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用 Ｂ 3、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉