高中生物总复习课件分析.ppt

③ 低温诱导多倍体的实验： A—优点：低温条件容易创造和控制、成本低、对人无害、易于操作。 B—流程： 培养——取材——制片——观察 1cm，4℃，36h 0.5cm~1cm 卡诺试液固定 改良苯酚品红染液 与正常植株相比，单倍体植株弱小，一般高度不育。 ② 单倍体植株特点： 3.单倍体 ① 概念：体细胞中含有本物种配子染色体数目 的个体叫做单倍体。 注：单倍体中含偶数个染色体组可育；含奇数个染色体组则不育； 其原因为：当染色体组为奇数，则在减数分裂形成配子时，同源染色体无法正常联会或联会紊乱，不能产生正常的配子。 青霉素高产菌株 有利变异少，具有不确定性，需处理大量 材料 提高突变率，大幅度改良某些性状。 利用物理或化学因素处理 基因突变 诱变育种 三倍体无子西瓜 普通小麦纯合体 杂交水稻 实例 发育延迟，结实率较低，在动物中难以开展。 技术复杂， 需与杂交育种配合 育种年限长 缺点 器官大，营养物质含量高 缩短育种年限 集各优良性状于一身 优点 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗 花药离体培养后再用秋水仙素处理使加倍 杂交→自交 杂交→杂种 方法 染色体变异 染色体变异 基因重组 原理 多倍体育种 单倍体育种 杂交育种 分子水平 年年制种 五、基因工程 概念： 按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，再放到另一种生物的细胞里，定向改造生物的遗传性状。操作水平为DNA分子水平。 原理： 基因重组 一、基本工具 1、限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的“剪刀” 2、DNA连接酶 基因的“针线” 3、运载体 基因的“运输工具” 来源与种类： 特点： 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要源于原核生物，4000种 EcoRⅠ限制酶 SmaⅠ限制酶 ——ＧＡＡＴＴＣ——黏性末端 ——ＣＣＣＧＧＧ——平末端 1、限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的“剪刀” 2、DNA连接酶 基因的“针线” E.coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 Ａ、相同点：均形成磷酸二酯键。 Ｂ、区别：DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二脂键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，因此DNA连接酶不需要模板。 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 3、运载体 基因的“运输工具” 1、限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的“剪刀” 2、DNA连接酶 基因的“针线” 3、运载体 基因的“运输工具” A、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 B、具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 C、具有某些标记基因，便于进行筛选。 D、对宿主细胞必须是无害的。 E、大小应合适，以便提取和在体外进行操作。 （1）运载体必须具备的条件： （2）常用运载体主要有： 质粒、λ噬菌体的衍生物、某些动植物病毒 二、基本操作程序 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心) 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 （1）从基因文库中获取目的基因 （2）利用PCR技术扩增目的基因 （3）化学方法人工合成 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心) 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 （1）基因表达载体（重组DNA）组成： 启动子+目的基因+终止子+标记基因 （2）所需工具酶： 限制酶、DNA连接酶 启动子是一段特殊的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录； 终止子是一段特殊的DNA片段，位于基因尾端，使转录停止。 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心) 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 转化：目的基因进入受体细胞，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 导入植物细胞 导入动物细胞 导入微生物细胞 1.农杆菌转化法（双子叶和裸子植物） 2.基因枪法 （单子叶植物） 3.花粉管通道法（简便、经济） 显微注射技术（受精卵） Ca2＋处理（感受态细胞） 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心) 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 是否插入目的基因（DNA分子杂交技术） 提取基因组DNA→目的基因探针→是否显示杂交带 是否转录（分子杂交技术） 提取mRNA→目的基因探针→是否显示杂交带 是否翻译 提取蛋白质→抗原—抗体杂交→是否显示杂交带 个体水平鉴定 1.抗虫或抗病的接种实验 2.与天然产品进行功能比较 三、应 用 1、作物育种 2、药物研制 3、环境保