各pH的磷酸鹽缓冲液(PBS)配制方法.docVIP

实验方案 镧铈对铜胁迫下豌豆种子萌发和生长的影响 1.La(Ⅲ)、Ce(Ⅲ)对重金属胁迫下种子萌发影响的显效剂量筛选 (1)浓度梯度设计： LaCl3/ CeCl 3溶液配置：先配置1g?L-1的LaCl3/ CeCl 3溶液母液，然后将母液分别稀释成浓度为5、10、20、40，60 mg?L-1梯度浓度，调节PH（HCL/NAOH）至6.5，对照(CK)为PH调节至6.5的去离子水。 重金属Cuso4浓度的设置： 10、25、50、100、200、400 mg?L-1，对照用蒸馏水。 (2)试材培养 种子预处理：选取均匀饱满的豌豆种子用0.1%HgCl2溶液消毒15min，分别用自来水和去离子水洗净，常温下晾干备用。 （3）实验设置：CK，La，Ce，Cu（共4组18个浓度57个样品） （4）试材处理： 选取LaCl3、 CeCl3和 CuSO4各个梯度溶液溶液，豌豆种子经预处理后用各个梯度溶液浸没处理，对照用蒸馏水，置于25±1℃浸种24h后，将处理后种子均匀排列在直径9cm、垫有2层滤纸的培养皿中，每处理加入一定量水培养（以没过种子2/3为标准），每处理3皿重复，每皿20粒。 指标测定方法： 种子发芽第三天测α—淀粉酶，第四天测发芽势，前三天测发芽指数和发芽率，第五天测量根长、茎长，第六天测根系活力、叶绿素含量、可溶性蛋白质、可溶性糖、SOD、POD、CAT、MDA. 2．