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ModFit LT ------细胞周期的分析软件 细胞周期分析是细胞生物学、肿瘤学等学科重要的研究及检测指标，大量的文献已证实，DNA细胞周期的分析对反映一个细胞群体的增殖活性具有重要意义，尤其对肿瘤细胞周期的分析，不仅有助于研究药物的作用机理，指导用药；还可检测治疗的反应及评价预后。 ModFit LT是由美国Verity Software House公司设计，专门用于流式细胞术中进行细胞周期分析的软件。它通过对DNA含量直方图进行曲线拟合，能快速计算出各种倍体细胞的含量、细胞周期各时相及亚二倍体细胞所占的比例、DNA指数、G0/G1期峰的变异系数等。此外，2.0版本还增加了“同步化分析”和“增殖分析”的功能，可分别进行同步化细胞和增殖细胞的研究。 运用ModFit LT进行自动分析 从苹果菜单下进入ModFit LT 在工具栏中点击File，选定所要分析的数据文件，单击Open 打开Edit菜单，分别对Debris，Aggregates和Fit Apoptosis Peak进行定义，以便软件根据样本的具体情况选择合适的分析模式 ?用ModFit LT进行任何分析之前，都必须定义所要分析的样本的类型，软件本身不能得出任何关于样本的资料，比如说，是新鲜样本，冻存组织还是石蜡切片？有无聚集体？有无凋亡等。 在工具栏中单击Auto键 软件开始自动分析样本，寻找峰的位置，确定倍体，选择合适的分析模式，进行非线性的最小二乘法分析，最后显示结果，而所有这些分析过程仅须几秒钟的时间。 通过点击工具栏中的Diags键，我们可以检验这次分析的合理性，评估的标准是根据DNA Consensus Conference所提出的来确定的。 可使用自动分析的样本通常比较典型，因此复杂的样本不适合用自动分析。 运用ModFit LT进行手动分析 如ModFit LT在自动分析过程中无法正确确定峰值的位置或样本的倍型，或者你希望自己选择分析的模式，那么你可以用手动分析来实现。 在工具栏中点击File，选定所要分析的数据文件，单击Open 选择用于DNA分析的参数：FL2-A 设门。软件最多允许同时设两个门，点击Gate 1或2前的小方框，然后单击Define the Gate，选择合适的X轴和Y轴，将门移动到所要分析的细胞群上，单击OK 单击工具栏中的Mod键或选择Analysis菜单中的Choose Model 在这个对话窗口中需要你来描述你所得到的样本的信息，比如说，样本的类型，有无异倍体等。每一个有关的资料都会影响到最终分析模式的选择。 ═选择碎片拟合的模式：新鲜/冻存，石蜡切片，没有碎片（不进行碎片分析）； ═选择倍型：异倍体，二倍体，四倍体； ═若有异倍体，则须确定是一个还是两个异倍体； ═选择细胞聚集体分析模式：有聚集体，没有聚集体，或自动检测（软件自行判断有无需要拟合聚集体）； ═选择是否拟合二倍体的S期：如异倍体的G0/G1期峰与二倍体G0/G1期峰明显分开,我们对每一个细胞周期的S期都能够进行拟合，则选择Fit Diploid S；如异倍体的G0/G1期峰与二倍体G0/G1期峰靠得非常近，则选择No Diploid S； ═选择能否看得见明显的G2/M期峰：Visible G2/M，Indistinct G2/M（软件将自动把G2/M期峰的位置固定在两倍于G0/G1期峰的位置； ═选择是否拟合凋亡：Fit Apoptosis，No Apoptosis； ═选择有无标准参照物：No Standards，One Standard，Two Standards； ═根据这些资料，软件选择分析的模式并将其显示在对话窗的下部； ═单击OK确认并关掉对话窗。 软件打开分析模式，确认每个峰所在的位置，并将Range放置于不同的峰上 如若软件对于各个峰的确认不太正确，你需要移动Range，将其放在正确的位置： ═将E1 Range放置在碎片峰的起始； ═确认D1 Range是否在二倍体的G0/G1期峰上，这个Range不一定将整个峰都包括在内，只要在峰的中心位置即可； ═移动A1 Range将其放置在异倍体G0/G1峰的中心位置； ═移动D2 Range将其放置于二倍体G2/M期峰的中心位置或是两倍于G0/G1期峰的位置； ═移动A2 Range将其放置两倍于异倍体G0/G1峰的道数，即异倍体G2/M期的位置； ═若T1 Range出现，你可以不去移动它的位置，它只是用来激活软件分析聚集体的功能； ═最后，需要将E2 Range放在这个直方图的最右边，用来识别碎片的终止位置； 这样，各个Range都各就各位了，可以开始进行分析了。 单击工具栏中的Fit键，软件开始以最小二