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疫苗生产的生物技术刘 文 玲邢台学院摘要:疫苗开发是一门以实验为基础的学科。DNA疫苗是继传统疫苗和基因工程蛋白亚单位疫苗之后的新一代疫苗,具有很好的市场潜力。消除病毒最有效的方法是使用疫苗,但常常需反复免疫单针疫苗能自动提供反复接种。本文通过重点介绍了DNA疫苗生产工艺的研究发展,DNA疫苗生产相关的质量控制体系以及研制能在注射后1至6月脉冲式释放疫苗抗原的注射,用控释微球释放时间取决于聚合物降解速率,降解速率则由聚合物成分和分子量所决定。关键词:疫苗;DNA疫苗;生产工艺;单针疫苗。一、疫苗 (一)疫苗的含义 疫苗是将病原微生物(如细菌、立克次氏体、病毒等)及其代谢产物,经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。 (二)疫苗的意义 疫苗的发现可谓是人类发展史一件具有里程碑意义的事件。因为从某种意义上来说人类繁衍生息的历史就是人类不断同疾病和自然灾害斗争的历史,控制传染性疾病最主要的手段就是预防,而接种疫苗被认为是最行之有效的措施。而事实证明也是如此,威胁人类几百年的天花病毒在牛痘疫苗出现后便被彻底消灭了,迎来了人类用疫苗迎战病毒的第一个胜利,也更加坚信疫苗对控制和消灭传染性疾病的作用。此后200年间疫苗家族不断扩大发展,目前用于人类疾病防治的疫苗有20多种,根据技术特点分为传统疫苗和新型疫苗。传统疫苗主要包括减毒活疫苗和灭活疫苗,新型疫苗则以基因疫苗为主。 (三)疫苗的种类疫苗是用来辅助人类免疫系统抵御疾病的,这就决定制造疫苗首先应选择合适的生物活体,使之即不引入新的病原体,又能增强人体的免疫能力。随着生物医学技术的不断发展,这一领域的技术也日渐多元化,疫苗种类也不断更新,主要有如下几种:(1)灭活疫苗 (2)减毒疫苗(3)类毒素疫苗 (4)非细胞疫苗 (5)基因工程疫苗二、生物技术疫苗 (一)生物技术疫苗的含义及其种类生物技术疫苗是利用生物技术制备的分子水平的/view/42785.htm \t _blank疫苗,包括基因工程亚单位疫苗、合成肽疫苗[1]、抗独特性疫苗、基因工程活疫苗、DNA疫苗以及转基因植物疫苗[2]。 (二)生物技术疫苗的意义生物技术疫苗克服了常规疫苗的大量培养病原微生物、灭活不彻底、活疫苗的毒力返强等缺点;动物机体免疫系统更集中产生免疫应答,有利于制成多价苗和多毁苗,简化角疫苗种程序;易于工业化生产,可以大幅度降低成本;有利于区分疫苗机体和野毒感染抗体,不影响疫苗的监测与诊断;利于疫苗的控制、净化和消灭,使用方便、便于保护等。生物技术疫苗也反应出一些问题,其中最大问题在于免疫原性方面还达不到常规疫苗的效果有的安全性问题也是不容忽视的,因此,可以肯定在相当长的一段时间内,生物技术疫苗还不可能替代常规疫苗甚至不能有大的发展。但是假以时日,当生物技术发展到一定程度后解决了现有的生物技术疫苗在免疫原性方面的不足时,生物技术疫苗肯定会得到空前的发展,从而取代(甚至取缔)常规疫苗。三、疫苗生产的迫切性在世界范围内,疫苗被应用于预防疾病,为人类健康水平的提高起到了关键作用,许多成功的事实,极大地增强了人类战胜疾病的勇气和信心,但是传染病问题依然非常严重。自1981年发现了人类免疫缺陷病毒(HIV),依当时的经验和科学技术水平,认为很快会研制出针对艾滋病的有效疫苗,然而,二十多年过去了,全球艾滋病感染者已达到4000万[3]。科学技术人员为防治疾病已耗资数千亿美元研制HIV病毒,虽有许多实验性疫苗进入临床,但仍然没有真正有效的疫苗问世[4]。目前已面市的19种治疗HIV感染的抗病毒药物,大多数毒副反应大,耐药性问题日益严重,而且这些药物都无法治愈HIV感染,只能延长艾滋病发作的时间。另外,这些药物昂贵的价格让许多发展中国家的患者无法承受。艾滋病的控制最终需要依赖于有效而安全实用的疫苗[5]。对于许多灭活疫苗、亚单位疫苗一般需要一到两次或更多次重复接种,才能有效地刺激免疫系统产生免疫记忆和保护效果,在应用上存在一定的不足。目前单针疫苗的研发是解决此类问题最有效的方法之一。四、临床用DNA疫苗生产工艺的研究 1990年Wolff JA等发现,肌肉注射质粒DNA可使外源性基因在体内有效表达,这为研制新型疫苗指明了方向。DNA疫苗的主要形态是携带编码抗原基因的质粒DNA,能在体内合成外源抗原蛋白,并诱导宿主细胞产生针对该抗原的体液和细胞免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。随着越来越多的DNA疫苗进入临床试验和产业化阶段,大规模制备临床级质粒DNA的生产工艺受到越来越多的关注。 (一)DNA疫苗生产工艺一般流程一套完整的质粒DNA大规模制备工艺是由许多相对独立的工艺单元构成的。DNA疫苗生产工艺的一般流程包括:质粒库和三级种子库的建立,工程菌的发酵培

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