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大庆铁人中学高三学年二轮复习生物练习题（七） 出题人：周延龙 审题人：李贵山 时间：2012-4-3 考察内容：生物选修3—现代生物科技专题，共10题，每题15分 1、科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答： (1)过程①表示的是采取?????????????????? 的方法来获取目的基因。 (2)根据图示分析，在构建重组质粒过程中，应用限制性核酸内切酶?? ?（Ⅰ或II）切割质粒，用限制性核酸内切酶? ??（Ⅰ或II）切割目的基因。用限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过????????? 原则进行连接。 (3)人的基因之所以能与大肠杆菌的质粒进行重组，原因是????????? 。 (4)将重组质粒导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的 溶液中处理，目的是 。含目的基因的重组质粒在“工程菌”中表达成功的标志是 。 （5）目的基因如果插入某抗性基因中，将使该抗性基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检查载体是否导入原本没有GeneⅠ和GeneⅡ的大肠杆菌，将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图a的结果（黑点表示菌落）。再将灭菌绒布按到图a的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是 ，由此说明目的基因插入了 中。 (6)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为???????? ?????? 。 写出目的基因导入细菌中表达的过程 。 2、研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题： (1) 从肝细胞中分离总RNA，经_________获得cDNA，之后经过_________扩增内皮抑素基因。 (2) 扩增的目的基因与PUC18质粒（如图所示）都用EcoR I和BamH I进行双酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接，还减少了________的连接，提高了重组质粒的比例。 (3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。 选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入_____________________________物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成_____颜色的菌落，原因是________________________________________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌，其突出的优点是：________________________________________________。 (4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养，获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，370C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72h后在显微镜下观察细胞存活情况并，__________________________________实验结果如下表所示。 结果说明__________________________________________________________________。 3、自1973年博耶和科恩成功地使外源基因在原核细胞中中表达开始,基因工程正式问世了,人们对DNA的关注也越来越多.分析并回答下列问题: （1）从生物组织中提取DNA