植物制片技术研究生课件摘要.pptVIP

植物解剖与制片技术 Plant Anatomy and Sectioning Technology 学时分配：理论课 4学时；实验课 24学时。 教学目的：通过对植物制片技术的掌握，为研究植物胚胎学、植物解剖学、作物栽培、遗传育种等教学、科研提供必备的技术。 主要参考书目： 1 植物显微技术，王灶安主编，农业出版社； 2 植物制片技术，李正理编著，科学出版社； 3 《西北植物学报》，《植物研究》，《武汉植物学研究》，《植物分类学报》等学术杂志。 考核方式：撰写实验报告：对所观察的器官结构进行详细的描述并作进一步的讨论，附上植物器官显微结构图。 植物显微制片技术 植物制片的类型和方法 切片法：徒手切片法 石蜡切片法 滑走切片机切片法 半薄切片法 超薄切片法 非切片法：离析法 压片法 整体封存法 石蜡法制片原理与方法 一、材料的选择与分割 1. 新鲜、健康、有代表性的材料； 2.生长发育的不同阶段; 3.大小适当，0.5cm左右. 二、杀生、固定与保存 杀生： 固定： 1 根据固定目的物本身的结构性质； 2 分割大的材料； 3 抽气； 4 标记. (整染） 固定液的配置及使用： FAA固定液： 适用范围：根、茎、叶、花药、子房 固定时间：24h 低温 配方 ： 福尔马林 5ml 冰醋酸 5ml 70% 酒精 90ml 卡诺固定液： 适用范围：根尖、花药、子房 固定时间：小于24h ，15-30分钟 配方 ： a b 纯酒精 15ml 30ml 氯仿 5ml 冰醋酸 5ml 1ml 保存： 70% 酒精 三、脱水 作用：1 除去组织内的水分； 2 使石蜡顺利进入细胞内 脱水剂： 1 酒精：50%--70%--85%--95%--100%（梯度脱水） 2 二氧杂环己烷 3 正丁醇 4 叔丁醇 5 丙酮 四 、透明 作用：1 使材料透明、干净； 2 便于包埋剂及封固剂的进入 透明剂： 1 二甲苯：1/2纯酒精+1/2二甲苯 ——二甲苯 2 甲苯或苯； 3 氯仿 4 丁香油、香柏油等 五、浸蜡 1 低温浸蜡：40℃左右（1夜） 2 高温浸蜡：58℃左右 （6小时以内） 六、包埋 1 选取合适熔点的石蜡； 2 包埋用具的准备 要点：动作迅速 七、切片 1 修块; 2 切片: 厚度在8-14μm a 切片有裂纹 b 蜡带弯曲 c 材料破碎 d 切片卷成圆筒 e 蜡带皱缩 八、粘片与展片 粘片剂: 明胶 1 g 石炭酸 2 g 甘油 15 ml