杜仲叶中绿原酸的提取工艺条件研究..docx

2001年12月ChemistryandIndustryofForestProductsDec.2001Ξ杜仲叶中绿原酸的提取工艺条件研究尉芹,景谦平,马希汉(西北农林科技大学林学院,陕西杨陵712100)WEIQ摘要:采用单因素和正交试验的方法,通过多重比较等统计手段,对影响绿原酸提取率的主要因素进行了分析,找出了从杜仲叶中提取绿原酸的最佳工艺条件:原材料杜仲叶用整叶(不粉碎),用40%乙醇以11∶6的料液比在80℃提取2h。关键词:绿原酸;杜仲叶中图分类号:R284.2;S794文献标识码:A文章编号:025322417(2001)0420027206绿原酸是植物在有氧呼吸过程中,经磷酸戊糖途径的中间产物合成的一种苯丙素类化合物,具有很强的药理活性,对消化系统、血液系统和生殖系统疾病均有显著疗效[1]。Hem2merl等发现,绿原酸及其衍生物是62磷酸葡萄糖移位酶体系的专一性抑制剂,有助于降低非胰岛素依赖性糖尿病患者所表现出的较高的肝糖排泄速度,显示出绿原酸在治疗糖尿病方面的良好前景[2]。Eich研究认为,绿原酸是很有希望的抗艾滋病毒(HIV)的先导化合物[3]。现在,在银黄制剂、双黄连针剂等药品的生产中,已经将绿原酸作为质量控制的主要指标之一,其含量越高,产品质量越好[4～6]。纯的绿原酸还是重要的化学试剂,在生理生化分析和化学工业中具有广泛的应用。目前我国尚无生产绿原酸的厂家,一般从国外进口,价格十分昂贵。虽然绿原酸在各类植物中的存在相当普遍,但含量较高的植物并不多见。近年来的研究表明,杜仲(Eucommiaulmoides)中含有较高的绿原酸,其中叶中含量为5%左右。杜仲在我国作为药用已经有几百年的历史,栽培面积相当广泛,全国约有杜仲林20万hm2,每年可产叶几百万吨[7],如果能够用于提取医用甚至化学纯绿原酸,无疑将会产生巨大的社会和经济效益。本课题对杜仲叶中的绿原酸的提取条件进行了研究,以期为大规模从杜仲叶中提取绿原酸提供工艺参数,也为杜仲叶的开发利用开辟一条新的途径。Ξ收稿日期:2001-02-21基金项目:陕西省重大科技项目(97K042J2)作者简介:尉芹(1958-),女,山西临猗人,副教授,博士生,从事经济植物资源开发利用的教学与研究工作。28林产化学与工业第21卷1材料与方法1.1材料1.1.1植物材料杜仲叶采自西北农林科技大学杜仲优树汇集圃。阴干,备用。1.1.2主要仪器754型紫外2可见光分光光度计(上海第三分析仪器厂);2FG285A型旋转蒸发器(上海医械专机厂);365nm紫外分析仪(上海科艺光学仪器厂)。1.1.3试剂绿原酸;乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等均为分析纯。1.2方法1.2.1绿原酸含量测定纸层析分离2紫外分光光度法[8]。1.2.2影响提取的因素试验1.2.2.1正交实验设计[9]以温度、时间、料液比3因素作为考察对象,每个因素选用3个水平,选用L9(34)表,并安排实验。1.2.2.2单因素试验随机抽取一定数量的阴干杜仲整叶(或16目叶粉),在80℃温度下鼓风干燥,直至恒重。冷却后用四分法取样,每份5g,置于250mL的平底烧瓶中,采用不同的实验设计方案进行提取,分别测定提取液或浸膏中绿原酸的含量并折算为每100g干叶中绿原酸的得率。2结果与分析2.1不同溶剂对绿原酸提取效果的影响绿原酸是一种弱极性的分子,25℃时在水中的溶解度约为4%,易溶于醇和丙酮,微溶于乙酸乙酯,在热水中有较大溶解度。考虑到试剂的价格和在工业化生产中的可行性,本研究选择了不同浓度乙醇和甲醇作溶剂,同时对用丙酮提取也进行了探讨。2.2.1不同浓度的乙醇对绿原酸提取效果的影响不同浓度乙醇对绿原酸的提取效果见图1。可以看出,随着乙醇浓度的增加,绿原酸的提取率逐渐升高,40%乙醇提取率最高。随后,绿原酸提取率随乙醇浓度的增加而降低,当乙醇浓度为95%时,绿原酸的溶出明显受到抑制。为了探讨40%乙醇在绿原酸提取方面与其他浓度乙醇的差别,作者进行了多重比较分析(LSD法),结果如表1所示。表1乙醇浓度影响的多重比较Table1MultiplecomparisonofeffectofethanolconcentrationonextractionX1X1-X1X1-X2X1-X3X1-X4X1-X5X6=4.44911.7314330.5286330.3817330.215730.1691X5=4.28001.5623330.3595330.212630.0466X4=4.23341.5157330.3129330.1660X3=4.06741.3497330.1469X2=3.92051.202833X1=2.7177注:D0.05=0.1695;D0.01=0.2568;X6、X5、X4、X3、X2、X1分别表示4